[發明專利]利用QCM傳感器檢測玉米褪綠斑駁病毒的方法及專用金片無效
| 申請號: | 201410049532.4 | 申請日: | 2014-02-13 |
| 公開(公告)號: | CN103792352A | 公開(公告)日: | 2014-05-14 |
| 發明(設計)人: | 黃新;徐江敏 | 申請(專利權)人: | 中國檢驗檢疫科學研究院 |
| 主分類號: | G01N33/569 | 分類號: | G01N33/569;G01N33/531 |
| 代理公司: | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人: | 關暢 |
| 地址: | 100121 北*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 利用 qcm 傳感器 檢測 玉米 斑駁 病毒 方法 專用 | ||
1.一種制備用于檢測病毒的QCM金片的方法,包括如下步驟:
1)用巰基十一酸和3-巰基丙酸共修飾QCM金片,得到修飾后金片;
2)將抗病毒抗體固定到所述修飾后金片,得到用于檢測所述病毒的QCM金片。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:
步驟1)中,所述巰基十一酸和3-巰基丙酸共修飾QCM金片按照如下方法制備:將所述QCM金片浸泡在含有巰基十一酸和3-巰基丙酸的乙醇溶液中;
步驟2)中,所述將抗病毒抗體固定到所述修飾后金片為將所述抗病毒抗體與所述修飾后金片上的巰基十一酸和3-巰基丙酸通過酰胺鍵連接。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:
步驟1)中,所述含有巰基十一酸和3-巰基丙酸的乙醇溶液中,所述巰基十一酸和所述3-巰基丙酸的摩爾濃度比為1:1-1:10,所述巰基十一酸和所述3-巰基丙酸的摩爾濃度比具體為1:1、1:5或1:10。
4.根據權利要求2或3所述的方法,其特征在于:所述巰基十一酸和所述3-巰基丙酸的摩爾濃度比為1:10。
5.根據權利要求2-4中任一所述的方法,其特征在于:
所述巰基十一酸在所述溶液中的終濃度為0.9mM;
所述3-巰基丙酸在所述溶液中的終濃度為9mM。
6.根據權利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:
步驟2)中,所述將抗病毒抗體固定到所述修飾后金片按照如下方法制備:先用含有EDC和Sulfo-NHS的溶液活化所述修飾后金片表面的巰基十一酸和3-巰基丙酸的羧基基團;再滴加所述抗病毒抗體,以固定抗體;再將BSA封閉,得到用于檢測所述病毒的QCM金片;
所述含有EDC和Sulfo-NHS的溶液中的EDC和Sulfo-NHS的摩爾比為4-5:1;
所述含有EDC和Sulfo-NHS的溶液中的EDC和Sulfo-NHS的摩爾比具體為5:1。
7.根據權利要求6中所述的方法,其特征在于:所述含有EDC和Sulfo-NHS的溶液中的EDC的終濃度為0.075M,且Sulfo-NHS的終濃度為0.015M。
8.根據權利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:所述抗病毒抗體為單克隆抗體或多克隆抗體,所述抗病毒抗體具體為單克隆抗體;
所述病毒具體為玉米褪綠斑駁病毒。
9.由權利要求1-8任一所述的方法制備的用于檢測病毒的QCM金片;所述病毒具體為玉米褪綠斑駁病毒。
10.權利要求9所述的用于檢測病毒的QCM金片在檢測病毒中的應用;所述病毒具體為玉米褪綠斑駁病毒。
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