[發明專利]L-丙氨酸-(14-冬凌草甲素)酯三氟乙酸鹽及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201410047904.X
• 申請日: 2014-02-11
• 公開（公告）號: CN104017000B
• 公開（公告）日: 2017-01-04
• 發明（設計）人: 孫飄揚;武乖利;邱振均;陳永江
• 申請（專利權）人: 江蘇恒瑞醫藥股份有限公司
• 主分類號: C07D493/08
• 分類號: C07D493/08;A61K31/352;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司11314
• 代理人: 程偉,李媛

技術領域

本發明涉及一種冬凌草甲素衍生物的三氟乙酸鹽及其制備方法，具體地說，本發明涉及L-丙氨酸-(14-冬凌草甲素)酯三氟乙酸鹽及其制備方法。

背景技術

早在上世紀70年代，唇形科香茶菜屬植物冬凌草良好的抗癌活性就引起了人們關注，冬凌草中含有單萜、二萜、三萜等萜類化合物以及生物堿、甾體、黃酮、揮發油、氨基酸、有機酸、單糖等成分，并具有抗腫瘤、抗菌消炎、增強免疫、抗氧化、抗突變、降壓等藥理作用。冬凌草甲素（Oridonin），是從冬凌草中提取出來的一種貝殼杉烯二萜類天然有機化合物，結構如下，占冬凌草有效成分的90％以上，是抗腫瘤的主要活性成分。

但是冬凌草甲素口服生物利用度不足5%，不能達到有效的血藥濃度；同時，冬凌草甲素幾乎不溶于水，采用靜脈給藥較為困難。對其結構進行修飾改造，改善其水溶性和活性，將其開發成為新的抗腫瘤藥物，這是目前冬凌草甲素研究的重要方向。有文獻結果表明（Modern?Chinese?Medicine?May2008，Vol110，No15），冬凌草甲素結構上各種取代位置的改變均有可能對抗腫瘤活性產生影響。C-1位若去掉-OH則對于人急性髓系白血病細胞系HL-60的細胞毒活性增加2-3倍；C-1位被酰化后能夠增強細胞毒作用，而C-2位若引入-OH后則使化合物細胞毒作用減弱，對HL-60細胞毒活性降低約5倍。6-位酰化以及6，14-位雙酰化則降低其活性。14-位去氧化合物的抗癌活性明顯降低，表明14-β羥基對于增加活性起重要作用。C-7位上的羥基被緊緊固定于活性中心，平行于C-14位羥基，這樣有利于協同C-14羥基的親核作用；C-14羥基酰化，可使其抗癌活性明顯增加。

本發明者通過深入研究發現，冬凌草甲素的14-位羥基與L-丙氨酸酯化后，產物不僅水溶性良好，而且在大鼠和犬體內的轉化率分別可達94.1%和128%。冬凌草甲素14位羥基與丙氨酸酯化后的產物穩定性較差，但與三氟乙酸成鹽后，不但提高了純度，并且增加了其穩定性，經藥理毒理實驗驗證，該化合物不僅具有與冬凌草甲素相似的活性，而且在體外血漿及體內都能迅速轉化為冬凌草甲素，發揮出冬凌草甲素的藥效活性；毒性研究結果顯示本品毒性較小，無遺傳毒性的擔憂；此外，本品克服了因使用非水刺激性溶媒造成靜脈炎和特殊制劑引起過敏的副作用，家兔血管刺激性試驗顯示本品對血管無刺激性，豚鼠全身過敏試驗也未見過敏現象，有效解決了冬凌草甲素成藥的上述問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種穩定的、水溶性較好的、能增強其活性的冬凌草甲素衍生物的三氟乙酸鹽（I）及其制備方法。

本發明提供了式（I）所示的L-丙氨酸-(14-冬凌草甲素)酯三氟乙酸鹽，其中L-丙氨酸-(14-冬凌草甲素)酯與三氟乙酸的化學配比為1:1，

本發明另一方面提供了式（I）所示的L-丙氨酸-(14-冬凌草甲素)酯三氟乙酸鹽的制備方法，具體方法如下：

以冬凌草甲素(II)為起始原料，通過上述反應式制備，即：冬凌草甲素(II)與N-BOC-L-丙氨酸發生14-位酯化反應，得到N-BOC-L-丙氨酸冬凌草甲素酯(III)，在三氟乙酸中脫除BOC保護基，成鹽得到L-丙氨酸-(14-冬凌草甲素)酯三氟乙酸鹽(I)。

在一個優選的實施方案中，所述14-位酯化反應在二環己基碳二亞胺的存在下進行。

上述方法中，步驟1、2所述反應可在溶劑中進行，所述的反應溶劑為鹵代烷類溶劑，優選二氯甲烷。

在本發明的制備方法中，所述反應溫度可以在較大范圍內選擇，例如，優選步驟1反應溫度為0～60℃，步驟2反應溫度為-10～10℃。

在本發明的制備方法中，步驟1反應時間為2～10小時，步驟2反應時間為0.5～4小時。