[發明專利]一種產紅色素的菌株及生產紅色素的方法

有效

• 申請號: 201410040007.6
• 申請日: 2014-01-27
• 公開（公告）號: CN103789218A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 許偉;程文;邵榮;顏秀花;陳立根;余曉紅;陳洪興
• 申請（專利權）人: 鹽城工學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;C09B61/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京瑞恒信達知識產權代理事務所(普通合伙) 11382
• 代理人: 曹津燕;李渤

技術領域

本發明屬于微生物工程技術領域，涉及一種產紅色素的菌株及利用該菌株生產紅色素的方法。

背景技術

色素為具有染色作用，能使有機物質染色或者用以顏色示蹤的物質，可用于改善物品和食物的色澤。因此，色素被廣泛應用于食品、化妝品及醫藥品等。

色素按其來源通常分為合成色素和天然色素。合成色素具有色澤鮮艷、著色力強、性質穩定且價格低廉的優點，被廣泛應用。但合成色素不但無營養價值而且還具有不同程度的毒性，有些甚至具有致癌或誘發染色體變異的作用，近年來合成色素的安全性問題被世界各國關注。與之相比，天然色素因其安全性高，并具有一定的營養價值和藥理作用而成為研究開發的熱點。

目前應用的天然色素大多數從天然動植物材料中提取，存在資源有限、生產工藝復雜、成本較高、提取率低及色素穩定性差等缺點，遠不能滿足市場的需求。

發明內容

針對上述問題，本發明的主要目的在于提供一種產紅色素的菌株及生產紅色素的方法，以利用微生物資源生產天然色素，克服以動植物為原材料生產天然色素的缺點，實現工業化大規模生產天然色素。

為達到上述目的，本發明提供一種產紅色素的菌株，該菌株分離自紫球藻，為刀孢蠟蚧菌，被命名為YCPP-01（Lecanicillium.sp），保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC），保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏日：2013年09月16日，保藏號：CGMCC?No.8168。

進一步地，作為本發明的YCPP-01（Lecanicillium.sp）菌株的生理生化特征為（在馬鈴薯固體培養基上，28℃倒置培養7天后的菌株）：菌落呈圓形，白色，邊緣為全緣狀；菌落質地為白色絨毛狀，菌絲生長較快，菌絲絨毛長；氣生菌絲為白色絨毛狀，生長迅速；培養基由無色變為紫紅色，如圖1所示。用棉蘭水浸片法制作標本片，在顯微鏡下觀察個體形態為：菌絲無隔，分枝，分生孢子，分生孢子梗分枝或不分枝。小型分生孢子呈橢圓形，無隔膜；大型分生孢子菌絲細胞產紅色素，絲狀真菌，有分生孢子，菌絲呈白色絨毛狀。

優選地，所述YCPP-01（Lecanicillium.sp）菌株采用以下方法制備：

將pH5-9優選pH自然的馬鈴薯固體培養基、沙氏固體培養基或查氏固體培養基滅菌后，倒入平皿，冷卻過夜后接入YCPP-01菌株，在20-30℃優選25-30℃下培養3-7天后得到YCPP-01（Lecanicillium.sp）菌株。

優選地，所述馬鈴薯固體培養基包含：200重量份馬鈴薯、18重量份葡萄糖、18重量份瓊脂及1000重量份蒸餾水；

所述沙氏固體培養基包含：20重量份葡萄糖、5重量份麥芽糖、10重量份蛋白胨、5重量份酵母浸膏、20重量份瓊脂及1000重量份蒸餾水；

所述查氏固體培養基包含：2重量份NaNO₃、1重量份KH₂PO₄、0.5重量份KCl、0.5重量份MgSO₄、0.01重量份FeSO₄、30重量份蔗糖、18重量份瓊脂及1000重量份蒸餾水。

優選地，所述菌株采用馬鈴薯固體培養基培養得到。

本發明進一步提供一種生產紅色素的方法，所述方法采用如上所述的菌株YCPP-01（Lecanicillium.sp）生產紅色素，包括以下步驟：

步驟a：將菌株YCPP-01（Lecanicillium.sp）接入pH5-9優選pH自然的馬鈴薯液體培養基中，在20-30℃優選28℃，轉速為90-160rpm優選120rpm條件下，培養5-7天后得到種子液；

步驟b：將步驟a得到的種子液按照3-10%優選5%的接種量轉接到馬鈴薯液體培養基中，在20-30℃優選28℃，pH5.0-9.0，優選pH自然條件下靜置培養7-10天，過濾，得到紅色素發酵液；

步驟c：將步驟b得到的紅色素發酵液進行離心、抽濾得到濾液，然后將濾液進行萃取、干燥得到紅色素。

優選地，所述步驟b中的馬鈴薯液體培養基包含200重量份馬鈴薯、18重量份葡萄糖及1000重量份蒸餾水。

優選地，所述步驟c中，將步驟b得到的紅色素發酵液進行離心分離，去除菌絲、孢子和其他不溶顆粒，將得到的紅色上清液用微孔膜進行抽濾，然后將得到的濾液進行旋轉蒸發得到濃縮液，將濃縮液抽濾后，采用乙酸乙酯對濾液進行萃取，將萃取液過濾，然后將過濾得到的濾液進行蒸發、干燥，得到紅色素。