[發明專利]檢測羥基自由基的比率型熒光探針及合成方法和用途

無效

• 申請號: 201410038820.X
• 申請日: 2014-01-27
• 公開（公告）號: CN103760145A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 莊梅;田陽
• 申請（專利權）人: 同濟大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/76;G01Q60/20;G01Q60/22
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司 31200
• 代理人: 張磊

1.一種檢測羥基自由基的比率型熒光探針，其特征在于：以牛血清蛋白為還原劑和保護劑，制備具有熒光的BSA-AuNCs（金納米簇），使牛血清蛋白上的胺基和對羥基自由基有特定響應的有機分子HPF（2-[6-(4’-Hydroxy)phenoxy-3H-xanthen-3-on-9-yl]benzoic?acid）的羧基反應，產生共價鍵，從而形成比率型熒光探針。

2.一種如權利要求1所述的檢測羥基自由基的比率型熒光探針的合成方法，其特征在于具體步驟如下：

（1）在37?℃和充分磁力攪拌的條件下，將5?體積?濃度為10?mM?的氯金酸水溶液加入到5?體積?質量濃度為50?mg/?mL的牛血清白蛋白水溶液，再加入0.5?體積濃度為1?M?的NaOH溶液，持續反應12?h；用透析膜（MWCO?:?3500）將反應得到的產物在超純水中透析，得到BSA-AuNCs溶液；

（2）室溫條件下，將一定量5?mM?的HPF的二甲基甲酰胺溶液加入到pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，加入適量催化劑?1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺活化，再加入步驟(1)所述BSA-AuNCs溶液反應10?h；所得產物在pH為7.4的磷酸鹽緩沖溶液中透析，得到比率型熒光探針溶液。

3.一種如權利要求1所述的檢測羥基自由基的比率型熒光探針的用途，其特征在于將比率型熒光探針用于化學體系、化學模擬生物體系中羥基自由基的檢測，生物活細胞和活組織內的羥基自由基的熒光成像檢測，以及臨床醫學上組織和器官中羥基自由基的檢測。