[發(fā)明專利]減毒瘟病毒

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410035977.7
• 申請日: 2009-06-24
• 公開（公告）號: CN103721250A
• 公開（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 格雷戈?duì)?邁耶斯;伯克.A.圖斯;伊娃-瑪利亞.舒爾曼
• 申請（專利權(quán)）人: 貝林格爾.英格海姆維特梅迪卡有限公司
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;C12N7/04;C12N7/01
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所 11105
• 代理人: 岑曉東

本申請是申請日為2009年06月24日、中國申請?zhí)枮?00980124328.1、發(fā)明名稱為“減毒瘟病毒”的發(fā)明申請的分案申請。

發(fā)明背景

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及動(dòng)物健康領(lǐng)域，尤其涉及減毒瘟病毒(pestivirus)，如傳統(tǒng)豬瘟病毒(classical?swine?fever?virus,CSFV)，牛病毒性腹瀉病毒(bovine?viral?diarrhea?virus,BVDV)或邊界病病毒(border?disease?virus,BDV)。

背景信息

瘟病毒在世界上許多國家是具有重大經(jīng)濟(jì)影響的動(dòng)物疾病的起因。現(xiàn)已知的病毒分離物分屬四個(gè)不同種，它們一起形成黃病毒科(Flaviviridae)的一個(gè)屬。

I/II牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)1型(BVDV-1)和2型(BVDV-2)引起牛的病毒性腹瀉(BVD)和家畜(cattle)的粘膜疾病(MD)(Baker,1987;Moennig?and?Plagemann,1992;Thiel?et?al.,1996)。BVDV區(qū)分成2個(gè)種是基于基因組序列的明顯不同(概述見Heinz?et?al.,2000)，從有限的交叉中和抗體反應(yīng)也可以明顯看出它們的區(qū)別(Ridpath?et?al.1994)。

III傳統(tǒng)豬瘟病毒(CSFV)以前稱作豬霍亂病毒，引起傳統(tǒng)豬瘟(CSF)或豬霍亂(HC)(Moennig?and?Plagemann,1992;Thiel?et?al.,1996)。

IV邊界病病毒(Border?disease?virus,BDV)一般發(fā)現(xiàn)于羊，引起邊界病(BD)。BDV宮內(nèi)感染小羊后，被持續(xù)感染的小羊可以出生，但很虛弱，并表現(xiàn)出不同的異常情況，其中最為人熟知的是“長毛搖擺(hairy?shaker)”綜合征(Moennig?and?Plagemann,1992;Thiel?et?al.,1996)。

瘟病毒是小的有包膜病毒，其正鏈單鏈RNA基因組既缺失5’帽也缺失3’poly(A)序列。該病毒基因組編碼一種約有4000個(gè)氨基酸的聚蛋白，它通過細(xì)胞蛋白酶和病毒蛋白酶參與的翻譯中加工和翻譯后加工產(chǎn)生最終裂解產(chǎn)物。病毒蛋白在該聚蛋白中按NH₂-N^pro-C-E^rns-E1-E2-p7-NS2-NS3-NS4A-NS4B-NS5A-NS5B-COOH順序排列(Lindenbach?and?Rice,2001)。蛋白C(＝核心蛋白或衣殼蛋白)以及糖蛋白E^rns、E1和E2代表瘟病毒顆粒的結(jié)構(gòu)成分，已有人在CSFV中予以證明(Thiel?et?al.,1991)。BVDV中也是如此。有人發(fā)現(xiàn)E2是抗體中和的靶，E^rns也是，但程度較低(Donis?et?al.,1988;Paton?et?al.,1992;van?Rijn?et?al.,1993;Weiland?et?al.,1990,1992)。E^rns缺乏典型的膜錨著結(jié)構(gòu)，可從感染的細(xì)胞大量分泌，有報(bào)道稱這種蛋白表現(xiàn)出RNA酶活性(Hulst?et?al.,1994;Schneider?et?al.,1993;Windisch?et?al.,1996)。這種酶活性對于病毒生命周期的功能目前還不清楚。這種酶活性依賴于兩個(gè)氨基酸鏈的存在，這兩個(gè)鏈在瘟病毒E^rns以及植物來源和真菌來源的不同的已知RNA酶之間是保守的。這兩個(gè)保守序列都含有組氨酸殘基(Schneider?et?al.,1993)。滅活E^rns內(nèi)部的RNA酶活性，得到減毒的無致病性(apathogenic)瘟病毒，其能用作改良的活疫苗(WO99/64604)。

瘟病毒糖蛋白E^rns在病毒體表面以及在感染細(xì)胞中表達(dá)為二硫鍵相連的同型二聚體。最C端半胱氨酸殘基在兩個(gè)E^rns單體之間形成分子間二硫鍵，導(dǎo)致形成E^rns同二聚體(Schneider?et?al.,1993)。最近有報(bào)道稱，將CSFV最C端半胱氨酸取代為絲氨酸導(dǎo)致活力CSFV，但其缺乏形成任何E^rns同二聚體的能力(van?Gennip?et?al.,2005)。