[發(fā)明專利]一種蛋黃油中膽固醇的含量測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410033729.9
• 申請(qǐng)日: 2014-01-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103728395A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王小妹;劉春芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州白云山漢方現(xiàn)代藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 廣州市深研專利事務(wù)所 44229
• 代理人: 姜若天

1.一種蛋黃油中膽固醇的含量測(cè)定方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）供試品溶液的制備：

以蛋黃油為原料，取蛋黃油0.25g，置25ml量瓶中，加三氯甲烷-甲醇（體積比2：1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液；

（2）膽固醇成分含量測(cè)定：

高效液相色譜實(shí)驗(yàn)條件如下：C₁₈色譜柱：150mm×3.9mm，5μm；柱溫：38℃；流動(dòng)相系統(tǒng)Ⅰ：以甲醇為流動(dòng)相A，以甲醇-異丙醇-正已烷(體積比10:70:20)為流動(dòng)相B；洗脫梯度：0-15?min：100%?A；15-17?min：100%-40%?A；17-27?min：40%?A；27-32?min：40%-100%?A；32-42?min：100%?A；洗脫時(shí)間：42?min；流動(dòng)相系統(tǒng)Ⅱ：以甲醇為流動(dòng)相A，以甲醇-二氯甲烷?(體積比50：50)為流動(dòng)相B；洗脫梯度：0-10?min：100%?A；10-20?min：100%-50%?A；20-25?min：50%-100%?A；25-30?min：100%?A；洗脫時(shí)間：30?min；紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)：205?nm；流速：0.8-1.2?ml/min;?柱溫：36-40℃；樣品進(jìn)樣量：10?μl；

膽固醇成分含量測(cè)定方法如下：取膽固醇對(duì)照品，制成每?1?ml分別含0.2mg、0.4mg、0.6mg、0.8mg、1.0mg的對(duì)照品溶液；

高效液相色譜測(cè)定：不同濃度的對(duì)照品溶液分別以10μl進(jìn)樣，測(cè)得各標(biāo)準(zhǔn)品溶液的高效液相色譜峰面積；以所得各標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品峰面積為縱坐標(biāo)，各對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo)分別做標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別計(jì)算得線性回歸方程；然后對(duì)10批供試品溶液進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定，得到膽固醇色譜峰的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算供試品中膽固醇的含量，并結(jié)合供試品的質(zhì)量，經(jīng)計(jì)算得到膽固醇的含量為4.33%~7.69%。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟（2）的色譜條件中流動(dòng)相系統(tǒng)Ⅰ：以甲醇為流動(dòng)相A，以甲醇-異丙醇-正已烷(體積比10:70:20)為流動(dòng)相B；洗脫梯度：0-15?min：100%?A；15-17?min：100%-40%?A；17-27?min：40%?A；27-32?min：40%-100%?A；32-42?min：100%?A；洗脫時(shí)間：42?min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量測(cè)定方法，其特征在于，所述高效液相色譜測(cè)定法步驟的色譜條件中流速為1.0?ml/min。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含量測(cè)定方法，其特征在于，所述步驟（2）的色譜條件中色譜柱溫為38℃。