[發明專利]四種果樹食心蟲分子鑒定引物及使用方法

有效

• 申請號: 201410033127.3
• 申請日: 2014-01-22
• 公開（公告）號: CN103882116A
• 公開（公告）日: 2014-06-25
• 發明（設計）人: 陳茂華;李玉婷;鄭燕;王康;錢路;吳偉
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學;江蘇出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心;新源縣農業技術推廣站
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
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技術領域

本發明涉及一種果樹病蟲鑒別方法，尤其涉及一種四種果樹食心蟲分子鑒定引物及使用方法。?

背景技術

蘋果蠹蛾Cydia?pomonella屬鱗翅目Lepidoptera卷蛾科Tortricidae、小卷蛾屬Cydia，寄主包括仁果類的蘋果、蘋果梨、沙果、梨、山楂、海棠，核果類的桃、李、杏、棗、櫻桃，漿果類的石榴，胡桃等園藝植物，是重要的世界性果樹害蟲之一。該蟲主要以幼蟲蛀果危害并取食種子，有轉果為害習性，蛀果率普遍在50％以上，嚴重時可達100％，常造成大量落果，降低果品的產量和品質。該蟲起源于歐洲東南部，之后隨著蘋果的移植和人為因素擴散到整個歐洲大陸，迄今為止，其已廣泛分布于美洲、非洲、澳洲和亞洲除東亞以外的所有蘋果產區。蘋果蠹蛾是我國重要的入侵害蟲，1957年我國首次有文獻報道在新疆庫爾勒地區蘋果蠹蛾的分布，至50年代中后期已遍布新疆全境。20世紀80年代中期該蟲進入甘肅省，并持續向東擴張，目前在張掖、酒泉、武威等地嚴重發生。自2006年以來，該蟲在黑龍江省牡丹江市和雞西市的大部分地區普遍發生，并可能對我國東部蘋果優勢產區造成威脅。因此，對于蘋果蠹蛾的識別和鑒定對于確保我國非疫區果業的建設和出口以及防止蘋果蠹蛾在我國的進一步入侵具有重要意義，而蘋果蠹蛾的快速鑒定方法是防止其進一步擴展的重要手段。?

梨小食心蟲Grapholita?molesta?Busck屬于鱗翅目Lepidoptera卷蛾科Tortricidae，簡稱梨小，義名東方果蛀蛾、桃折心蟲，是世界性的主要蛀果害蟲之一。梨小食心蟲分布于亞洲、歐洲、北美洲、澳洲，幼蟲主要為害梨、杏、桃、李、山楂等的果實和新梢，在不同的寄主植物上為害部位不同，在我國分布很廣，從南到北均有發生。為害新梢時，多從新梢頂端的葉柄基部蛀入髓部，由上向下蛀食，蛀孔外有蟲糞和樹膠，被害嫩梢的葉片逐漸凋萎下垂，最后枯死。果實以梨、桃、杏受害最重。為害梨果時，早期為害的入果孔較大，有蟲糞排出，孔口周圍變黑腐爛、凹陷，故又稱“黑膏藥”。后期為害的入果孔很小，孔口周圍仍呈綠色，幼蟲直向果心蛀食果肉和種子，果面不凹陷變形。梨小食心蟲有轉移寄主的習性，在桃、梨混栽的果園為害比較嚴重，為害后不僅影響樹冠的擴大和成形，而且嚴重降低了果質和產量。蘋果蠹蛾和梨小食心蟲幼蟲非常相似，主要靠腹部末端有無臀櫛來區分，但是低齡幼蟲仍然很難鑒定，即使專業人員也不容易進行準確的鑒定。?

沙果小食心蟲Grapholita?dimorpha?Komai屬鱗翅目Lepidoptera卷蛾科Tortricidae，危害沙果、李子和山里紅的果實，于1996年在黑龍江報道，為我國新紀錄種。成蟲將卵產在果實表面，孵化后幼蟲鉆入果實危害，在果實的蛀孔處有淚珠狀果膠流出，幼蟲在果實內結繭化?蛹，羽化前鉆出果實在蛀孔處有蛹殼。沙果小食心蟲和梨小食心蟲是近緣種，二者在外部形態和生物學特性上非常相似，田間難以正確區分。沙果小食心蟲和梨小食心蟲這兩種害蟲主要通過雄性后翅外緣下部凹入的有無、雌性囊突的大小以及果實上蛹殼的有無進行區分，但它們在外部形態及生物學特性上非常相似，極易混淆，對它們的快速準確鑒定十分困難。此外，研究表明梨小食心蟲性信息素可以誘到98.8％的梨小食心蟲和1.2％的沙果小食心蟲，而沙果小食心蟲性信息素可以誘到99.7％的沙果小食心蟲和0.3％的梨小食心蟲，這更為兩種害蟲的區分增加了難度。?

李小食心蟲Grapholitha?funebrana?Treitscheke又稱李小蠹蛾，隸屬于鱗翅目Lepidoptera卷蛾科Tortricidae，分布于我國的東北、華北、西北等各地。寄主有李、杏、櫻桃、桃、郁李等多種植物，其中以李受害最重。以幼蟲駐果危害，蛀果前常在果面上吐絲結網，棲于網下開始啃食果皮蛀入果內，早期入果孔為黑色，數日后即有蟲糞排出。豆粒大的果實極易大量脫落，以后被害果在入果孔流出大量水珠狀果膠滴。入果后蛀食果仁或縱橫串食，并串到果柄附近咬壞輸導系統，小果變紫紅色，呈“紅糖餡”不堪食用。有的果園蟲果率競達80％～90％，造成增產不增收。本種與梨小食心蟲很近似，成蟲主要區別在于：本種前翅較狹長，前翅顏色淡，為煙灰色；前緣白色鉤狀紋不明顯，有18組，而梨小食心蟲則明顯，有10組；梨小食心蟲前翅中室端部附近有一明顯斑點，本種則無。幼蟲頭部黃褐色。前胸背板淺黃或黃褐色；臀板淡黃褐或玫瑰紅色，上有20多個深褐色小斑點；腹足趾鉤粗短，為不規則雙序，而梨小食心蟲細長且為單序，臀櫛5～7齒。?