[發明專利]一種獸藥殘留的檢測方法

有效

• 申請號: 201410032399.1
• 申請日: 2014-01-23
• 公開（公告）號: CN103760269A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 王海;田亞平;姜艷彬;單吉浩
• 申請（專利權）人: 姜艷彬;田亞平
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京市浩天知識產權代理事務所 11276
• 代理人: 劉云貴

技術領域

本發明涉及以一種檢測方法，特別是涉及一種獸藥殘留的檢測方法。

背景技術

獸藥在防治動物疾病、提高生產效率、改善畜產品質量等方面起著十分重要的作用。然而，由于養殖人員對科學知識的缺乏以及一味地追求經濟利益，致使濫用獸藥現象在當前畜牧業中普遍存在。

隨著人們對動物源食品由需求型向質量型的轉變，動物源食品中的獸藥殘留已逐漸成為全世界關注的一個焦點。獸藥殘留是指用藥后蓄積或存留于畜禽機體或產品(如雞蛋、奶品、肉品等)中原型藥物或其代謝產物，包括與獸藥有關的雜質殘留。目前，在動物源食品中較容易引起獸藥殘留量超標的獸藥主要有抗生素類、磺胺類和激素類等藥物。

濫用獸藥極易造成動物源食品中有害物質的殘留，這對人體健康造成直接危害。例如長期食用獸藥殘留超標的食品后，當體內蓄積的藥物濃度達到一定量時人體會產生多種急慢性中毒現象。目前，國內外已有多起有關人食用鹽酸克侖特羅超標的豬肺臟而發生急性中毒事件的報道。

四環素類藥物能夠與骨骼中的鈣結合，抑制骨骼和牙齒的發育。磺胺類藥物能夠破壞人體造血機能等。另一方面，動物機體長期反復接觸某種抗菌藥物后，其體內敏感菌株受到選擇性的抑制，從而使耐藥菌株大量繁殖，耐藥性細菌的產生使得一些常用藥物的療效下降甚至失去療效。此外，濫用獸藥對畜牧業的發展和生態環境也造成極大危害。動物用藥后，一些性質穩定的藥物隨糞便、尿被排泄到環境中后仍能穩定存在，從而造成環境中的藥物殘留。長期濫用藥物嚴重制約著畜牧業的健康持續發展。如長期使用抗生素易造成畜禽機體免疫力下降，影響疫苗的接種效果，還可引起畜禽內源性感染和二重感染。

對動物性食品中的獸藥殘留進行監控的一個重要手段就是建立快速準確的殘留分析方法。目前，報道的文獻及國家標準中大多是單一獸藥或單一種類獸藥的檢測方法，但在實際工作中，由于動物性食品安全的保證需要多個指標進行綜合指證，因此，單個樣本常需要多次檢測工作，極大的浪費了人力、物力及財力。多殘留的檢測能夠更好的節省時間、提高工作效率，并能更加有效地監測動物產品的安全性。另一方面，國內外報道的動物源性食品中藥物殘留檢測的檢測方法主要有液相色譜法（HPLC）、氣相色譜-質譜聯用法(GC-MS)、液相色譜-串聯質譜聯用法(LC-MS/MS)、酶聯免疫法及生物傳感器技術。

酶聯免疫分析技術(ELISA)是一種將酶化學反應的敏感性和抗原抗體免疫反應的特異性相結合的方法，其敏感性和特異性較好。ELISA具有樣品前處理簡單，純化步驟少，大量樣本分析時間短，適合于做成試劑盒現場篩選等優點，使其可實現快速現場監測，是現階段食品安全檢測領域應用較多的一項檢測技術。但它也存在著很多缺陷：對試劑的選擇性高，很難同時分析多種成分；對結構類似的化合物有一定程度的交叉反應；分析分子量很小的化合物或很不穩定的化合物有一定的困難。

生物傳感器是由一種生物敏感膜和電化學轉換器兩部分配合，對特定種類的化學物質或生物活性物質具有選擇性和可逆響應的分析裝置。在獸藥殘留分析上得到了較廣泛的應用。雖然生物傳感器具有微型化、響應速度快、樣品用量少的特點，但還存在著結果的穩定性、重現性和使用壽命方面的問題。

現有技術的方法常有靈敏度不高、前處理繁瑣、檢測藥物單一或重現性不好等問題，很難滿足對藥物殘留的同時確證檢測。

液質聯用（HPLC-MS）的檢測方法以液相色譜作為分離系統，質譜為檢測系統。樣品在質譜部分被離子化后，經質譜的質量分析器將離子碎片按質量數分開，經檢測器得到質譜圖。液質聯用體現了色譜和質譜優勢互補，將色譜對復雜樣品的高分離能力，與MS具有高選擇性、高靈敏度及能夠提供相對分子質量與結構信息的優點結合起來，在藥物分析領域具有了廣泛的應用。液質聯用（HPLC-MS）分析樣品中定性和定量方面的優勢是單獨液相分析不能媲美的。

發明內容

本發明解決的技術問題是：提供一種新的獸藥殘留的檢測方法，具體來說，其是通過液質聯用的檢測方法實現多種類多樣品的檢測。

具體來說，本發明是通過如下技術方案實現的：

一種獸藥殘留的檢測方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（1）樣品的處理：將待測樣品進行前處理，加入提取劑后進行勻漿，之后進行超聲提取，之后進行第一次離心分離得到上清液，用氮氣將上清液吹干后得到的殘余物用初始流動相溶解，混勻，之后進行第二次離心分離得到上清液，取上清液進行微孔濾膜過濾得到的濾液用于UPLC-MS/MS測定；

（2）獸藥殘留的測定