[發(fā)明專(zhuān)利]一種獸藥殘留的檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410032399.1
• 申請(qǐng)日: 2014-01-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103760269A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王海;田亞平;姜艷彬;單吉浩
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 姜艷彬;田亞平
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 北京市浩天知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 11276
• 代理人: 劉云貴

1.一種獸藥殘留的檢測(cè)方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（1）樣品的處理：

將待測(cè)樣品進(jìn)行前處理，加入提取劑后進(jìn)行勻漿，勻漿之后進(jìn)行超聲提取，之后進(jìn)行第一次離心分離得到上清液，用氮?dú)鈱⑸锨逡捍蹈珊蟮玫降臍堄辔镉贸跏剂鲃?dòng)相溶解，混勻，之后進(jìn)行第二次離心分離得到上清液，取上清液進(jìn)行微孔濾膜過(guò)濾得到的濾液用于UPLC-MS/MS測(cè)定；

（2）獸藥殘留的測(cè)定

將步驟（1）得到的樣品進(jìn)行超高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用的測(cè)定，測(cè)定條件如下：

色譜條件：色譜柱為Waters?Acquity?UPLC?BEH?C₁₈柱；流動(dòng)相為甲醇和甲酸水溶液，洗脫方式為梯度洗脫；

質(zhì)譜條件：電噴霧離子源(ESI+)；源溫為105℃-115℃；脫溶劑溫度為340℃-360℃；脫溶劑氣流速度為600L·h^-1-700L·h^-1；錐孔反吹氣流速度為45L·h^-1-55L·h^-1。

2.如權(quán)利要求1所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中所述獸藥為四環(huán)素類(lèi)藥物、β受體激動(dòng)劑類(lèi)藥物、喹諾酮類(lèi)藥物和/或磺胺類(lèi)藥物。

3.如權(quán)利要求1或2所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中所述獸藥為四環(huán)素、土霉素、金霉素、強(qiáng)力霉素、特步他林、西馬特羅、沙丁胺醇、菲諾特羅、萊克多巴胺、氯丙那林、克倫特羅、妥布特羅、噴布洛爾、苯乙醇胺A、培氟沙星，環(huán)丙沙星，恩諾沙星，氧氟沙星，伊諾沙星、吡哌酸、萘啶酸、西諾沙星、諾氟沙星、達(dá)氟沙星、洛美沙星、二氟沙星、沙氟沙星、司帕沙星、磺胺鄰二甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基噁唑、磺胺對(duì)甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧噠嗪、磺胺甲噁唑、磺胺氯達(dá)嗪、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺醋酰、磺胺二甲異噁唑、磺胺苯吡唑、磺胺二甲氧嘧啶和/或磺胺喹噁啉中的一種、幾種或全部。

4.如權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，步驟（2）所述梯度洗脫程序?yàn)椋?!-- SIPO -->

0-10.0min：甲醇的體積比為3.0％-90.0%；

10.0-10.1min：甲醇的體積比為90.0％-3.0％；

10.1-13.0min：甲醇的體積比為3.0％。

5.如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中步驟（1）所述氮?dú)獯蹈缮锨逡旱臏囟葹?5℃-35℃，優(yōu)選在30℃下進(jìn)行。

6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中步驟（1）所述第一次離心和第二次離心的轉(zhuǎn)速為9000r·min^-1-11000r·min^-1，離心的時(shí)間為8min-12min，優(yōu)選所述第一次離心和第二次離心的轉(zhuǎn)速為10000r·min^-1，離心的時(shí)間為10min。

7.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中步驟（1）所述提取劑為10%三氯乙酸水溶液與乙腈的混合溶液；優(yōu)選兩者的體積比例為10%三氯乙酸水溶液：乙腈=（15～25）：（75～85）；更優(yōu)選兩者的體積比例為10%三氯乙酸水溶液：乙腈=20：80。

8.如權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中步驟（1）所述在第一次離心分離后得到上清液的同時(shí)得到沉淀，對(duì)沉淀進(jìn)行再次提取和分離，得到上清液與第一次離心分離得到的上清液進(jìn)行合并，將合并后的上清液進(jìn)行下一步驟的氮?dú)獯蹈伞?/p>

9.如權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中步驟（2）的甲酸水溶液的體積濃度為0.04％-0.07％，優(yōu)選體積濃度為0.05％。

10.如權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的獸藥殘留的檢測(cè)方法，其中步驟（2）所述色譜條件：色譜柱為Waters?Acquity?UPLC?BEH?C₁₈柱；流動(dòng)相為甲醇和甲酸水溶液，洗脫方式為梯度洗脫；流速為0.25mL·min^-1；柱溫為30℃。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子源(ESI+)；毛細(xì)管電壓為3.5KV；錐孔電壓為3.0V；RF透鏡電壓為0.5V；源溫為110℃；脫溶劑溫度為350℃；脫溶劑氣流速度為650L·h^-1；錐孔反吹氣流速度為50L·h^-1。