[發明專利]棉鈴蟲轉鐵蛋白基因HaTrf及其應用

有效

• 申請號: 201410028726.6
• 申請日: 2014-01-21
• 公開（公告）號: CN103789320A
• 公開（公告）日: 2014-05-14
• 發明（設計）人: 高希武;張雷;尚慶利;劉曉嵐;路瑤
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N15/12
• 分類號: C12N15/12;C12N15/11;C07K14/79;A01N57/16;A01P7/04
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.棉鈴蟲轉鐵蛋白基因HaTrf，其特征在于，其編碼的氨基酸序列如SEQ?ID?No.3所示。

2.根據權利要求1所述轉鐵蛋白基因HaTrf，其特征在于，其全長編碼序列如SEQ?ID?No.1所示。

3.用于擴增權利要求1或2所述轉鐵蛋白基因編碼序列的引物對，其特征在于，包括正向引物F：5’-GCCATGGTATCAAAAATAAAATATAT-3’和反向引物R：5’-AATAACATCATGGATTTGCTTGAA-3’。

4.權利要求1或2所述轉鐵蛋白基因HaTrf在抑制棉鈴蟲的生長發育中的應用。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述應用具體包括以下步驟：

1）以權利要求1或2所述轉鐵蛋白基因為模板，利用引物F1：CAAGCAGACATCGTGCCAGT和引物R1：GTCTAGCTGCCCAGGAACAG，擴增得到棉鈴蟲轉鐵蛋白基因部分序列，所述部分序列如SEQ?ID?No.2所示；

2）根據步驟1）擴增得到的棉鈴蟲轉鐵蛋白基因部分序列，用于體外轉錄試劑盒合成HaTrf基因的dsRNA，該dsRNA后與棉鈴蟲人工飼料混合飼喂2齡棉鈴蟲幼蟲。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于，所述dsRNA的飼喂以雙蒸水為載體，dsRNA的飼喂量為35μg/g。

7.權利要求1或2所述轉鐵蛋白基因HaTrf在提高棉鈴蟲對植物次生物質2-十三烷酮的敏感性中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述應用具體包括以下步驟：

1）以權利要求1或2所述轉鐵蛋白基因為模板，利用引物F1：CAAGCAGACATCGTGCCAGT和引物R1：GTCTAGCTGCCCAGGAACAG，擴增得到棉鈴蟲轉鐵蛋白基因部分序列，所述部分序列如SEQ?ID?No.2所示；

2）根據步驟1）擴增得到的棉鈴蟲轉鐵蛋白基因部分序列，用于通過體外轉錄試劑盒合成HaTrf基因的dsRNA，該dsRNA后與植物次生物質2-十三烷酮及棉鈴蟲人工飼料混合飼喂2齡棉鈴蟲幼蟲。

9.根據權利要求8所述的應用，其特征在于，所述dsRNA的飼喂以雙蒸水為載體，dsRNA的飼喂量為35μg/g。