[發(fā)明專利]薄皮甜瓜中果肉蛋白質(zhì)組分析方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410026620.2 | 申請日: | 2014-01-21 |
| 公開(公告)號: | CN103760210A | 公開(公告)日: | 2014-04-30 |
| 發(fā)明(設計)人: | 郝敬虹;黃雅芳;房克鳳;楊瑞;劉超杰;韓瑩琰;楊柳;王建立;張卿;宋婷婷;孫中華;于同泉;王紹輝;范雙喜 | 申請(專利權)人: | 北京農(nóng)學院 |
| 主分類號: | G01N27/447 | 分類號: | G01N27/447;G01N1/28 |
| 代理公司: | 北京中恒高博知識產(chǎn)權代理有限公司 11249 | 代理人: | 張秋云 |
| 地址: | 100000 北京市昌平區(qū)回*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 甜瓜 果肉 蛋白質(zhì) 組分 方法 | ||
1.一種薄皮甜瓜中果肉蛋白質(zhì)組分析方法,其特征在于:是將薄皮甜瓜中果肉總蛋白質(zhì)提取后,首先進行等電聚焦電泳,再進行SDS-PAGE凝膠垂直電泳。
2.根據(jù)權利要求1所述的方法,其特征在于:所述薄皮甜瓜蛋白質(zhì)提取是將薄皮甜瓜中果肉用Tris提取液/Tris-飽和酚提取,用含乙酸銨的甲醇溶液沉淀得到的。
3.根據(jù)權利要求2所述的方法,其特征在于:每1g薄皮甜瓜中果肉需要3~4?ml?Tris提取液和3~4?ml?Tris-飽和酚。
4.根據(jù)權利要求3所述的方法,其特征在于:所述Tris提取液和Tris-飽和酚的體積比為1:1。
5.根據(jù)權利要求1所述的方法,其特征在于:所述等電聚焦電泳中使用24cm膠條。
6.根據(jù)權利要求4所述的方法,其特征在于:所述等電聚焦電泳中上樣量為800μg蛋白質(zhì),終上樣體積為450μl。
7.根據(jù)權利要求1所述的方法,其特征在于:所述等電聚焦電泳后包括膠條平衡的步驟,所述膠條平衡分兩步,每步20min。
8.根據(jù)權利要求1所述的方法,其特征在于:在所述SDS-PAGE凝膠垂直電泳中,先1W?/塊跑1h,瓊脂糖形成一條直線后,調(diào)成5W/塊跑8h。
9.根據(jù)權利要求1所述的方法,其特征在于:所述SDS-PAGE凝膠垂直電泳后包括固定、染色、脫色的步驟,在固定后用純水清洗,所述染色時間為24小時。
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