[發(fā)明專利]一種猴腿蹄蓋蕨活性多酚的提取方法及其用途

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410024972.4
• 申請(qǐng)日: 2014-01-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103784483A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-05-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盛繼文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濰坊醫(yī)學(xué)院
• 主分類號(hào): A61K36/11
• 分類號(hào): A61K36/11;A61P39/06
• 代理公司: 北京聯(lián)瑞聯(lián)豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11411
• 代理人: 朱廣存

1.一種猴腿蹄蓋蕨活性多酚的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）猴腿蹄蓋蕨粗提物的制備：

A：甲醇提取：將猴腿蹄蓋蕨根莖粉碎，用甲醇室溫浸泡，過(guò)濾，合并濾液，濃縮，得甲醇提取物浸膏；

B：石油醚萃取：將得到的甲醇提取物浸膏用蒸餾水溶解，得到甲醇提取物浸膏溶液，然后用石油醚萃取，除去脂溶性成分，得到水溶液；

C：正丁醇萃取：將得到的水溶液用水飽和的正丁醇萃取，濃縮，得正丁醇萃取物浸膏；

（2）猴腿蹄蓋蕨活性多酚的純化：

D：硅膠柱分離：將得到的正丁醇萃取物浸膏取75g，用甲醇溶解，上硅膠柱，用石油醚-乙酸乙酯-甲醇梯度洗脫，洗脫速度2～8mL/min；洗脫液依次為：石油醚/乙酸乙酯體積比為15～1:1的洗脫液20～30L、乙酸乙酯洗脫液10～15L、乙酸乙酯/甲醇體積比為15～6:1的洗脫液6～8L和乙酸乙酯/甲醇體積比為5:1的洗脫液6～8L，乙酸乙酯/甲醇體積比為1:1的洗脫液8～10L；收集乙酸乙酯洗脫液和乙酸乙酯/甲醇體積比為5:1的洗脫液，合并，減壓濃縮，得棕黑色浸膏；

E：Sephadex?LH-20柱色譜純化：將棕黑色浸膏用甲醇溶解，Sephadex?LH-20柱色譜純化，CH₂Cl₂-甲醇梯度洗脫，洗脫速度2～8mL/min，洗脫液依次為：CH₂Cl₂洗脫液3～5L、CH₂Cl₂/甲醇體積比為15～1:1的洗脫液15～20L和甲醇洗脫液7～10L，收集甲醇洗脫液，濃縮，得猴腿蹄蓋蕨活性多酚。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種猴腿蹄蓋蕨活性多酚的提取方法，其特征在于：所述的甲醇提取具體為：稱取猴腿蹄蓋蕨粉碎根莖，按1:5～1:8料液比加入甲醇，室溫浸泡2～3次，1～3個(gè)月/次，期間時(shí)常攪動(dòng)，過(guò)濾，合并濾液，濃縮，得到甲醇提取物浸膏。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種猴腿蹄蓋蕨活性多酚的提取方法，其特征在于：所述的甲醇提取物浸膏溶液的濃度為70-90mg/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種猴腿蹄蓋蕨活性多酚的提取方法，其特征在于：所述的石油醚萃取采用三次萃取，具體為第一次用甲醇提取物浸膏溶液體積1/3的石油醚，第二次用甲醇提取物浸膏溶液體積1/4的石油醚，第三次用甲醇提取物浸膏溶液體積1/6的石油醚。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種猴腿蹄蓋蕨活性多酚的提取方法，其特征在于：所述的正丁醇萃取采用三次萃取，具體為第一次用甲醇提取物浸膏溶液體積1/3的正丁醇萃取，第二次用甲醇提取物浸膏溶液體積1/4的正丁醇萃取，第三次用甲醇提取物浸膏溶液體積1/6的正丁醇萃取。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種猴腿蹄蓋蕨活性多酚的提取方法，其特征在于：所述的濃縮采用真空濃縮，真空度0.1～0.08MPa，溫度為40～75℃。

7.權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所制備的猴腿蹄蓋蕨活性多酚在制備治療抗衰老藥物中的應(yīng)用。