[發(fā)明專利]花葉山菅蘭的組織培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410024947.6
• 申請日: 2014-01-20
• 公開（公告）號: CN103749304A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳建華;黃建榮;沈勤
• 申請（專利權(quán)）人: 上海上房園藝有限公司;上海上房園林植物研究所有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 林君如

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物組培領(lǐng)域，尤其是涉及一種花葉山菅蘭的組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

花葉山菅蘭為百合科山菅蘭屬園藝栽培品種，屬于多年生草本植物，株高50-70厘米；葉近基生，2列，狹條狀披針形，革質(zhì)，長30-60厘米；莖橫走，結(jié)節(jié)狀，節(jié)上有細而硬的細根；花葶從葉叢中抽出，圓錐花序長10-30厘米，花多朵，夏季開放，淡紫色，漿果紫藍色。花葉山菅蘭株形優(yōu)美，葉色秀麗，葉邊緣具銀白色條紋，清逸美觀，深受園藝工作者的喜愛，在園林中常作地被植物觀賞，常用于林下、園路邊、山石旁，在室內(nèi)亦可作盆栽觀賞。園林中多叢植或孤植于花境、庭院，又可做疏林地被植物，是良好的花鏡與庭院材料。市場需求量大，種苗供應(yīng)受限制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種保證母本性狀、移栽成活率高的花葉山菅蘭的組織培養(yǎng)方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：

花葉山菅蘭的組織培養(yǎng)方法，采用以下步驟：

(1)取花葉山菅蘭從基部萌發(fā)的小芽，沖洗干凈后依次用75v／v％的乙醇浸泡30s、1wt‰升汞浸泡15min、無菌水沖洗5-6次，吸干表面水份后取小芽基部切成1cm長，接種于小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基上的營養(yǎng)成分為MS+6-BA1.0-5.0mg／L+NAA0.1-0.5mg／L，控制培養(yǎng)溫度為24-30℃，光照為70-100μmol／ms，進行芽誘導(dǎo)培養(yǎng)；

(2)小芽接種于小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上4周后開始膨大并出現(xiàn)黃綠色突起，2周后可見明顯的愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng)1個月，切下帶芽愈傷組織分別放入增殖培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分為MS+6-BA1.0-3.0mg／L-+NAA0.1-0.3mg／L，控制培養(yǎng)溫度為24-30℃，光照為70-100μmol／ms，進行增殖培養(yǎng)；

(3)誘導(dǎo)出的叢生芽每叢有2-3株可以伸長，其余處于矮化狀態(tài)，分成小叢或單芽后放入壯苗培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分為MS+6-BA0.5-2.0mg／L+NAA0.1-0.2mg／L上，控制培養(yǎng)溫度為24-30℃，光照為70-100μmol／ms，進行壯苗培養(yǎng)，不定芽迅速伸長，30天后長到2-3cm；

(4)取2-3cm的小植株轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，該培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分為MS+NAA0.1-1.0mg／L，控制培養(yǎng)溫度為24-30℃，光照為70-100μmol／ms，20天后幼苗基部分化出許多白色的根原基，30天后長至2-3cm；

(5)生根培養(yǎng)30天，根系長至1-2cm，選擇根系發(fā)達生長健壯的無菌苗，室內(nèi)開瓶煉苗3天，取出后洗凈根部瓊脂，在溫室中馴化40天后，即可移栽室外。

所述的小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA1.0mg／L+NAA0.1mg／L，MS+6-BA3.0mg／L+NAA0.3mg／L或MS+6-BA5.0mg／L+NAA0.5mg／L。

所述的小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA3.0mg／L+NAA0.3mg／L。

所述的增殖培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA1mg／L-+NAA0.1mg／L，MS+6-BA2mg／L+NAA0.2mg／L或MS+6-BA3mg／L+NAA0.3mg／L。

所述的增殖培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA2mg／L+NAA0.2mg／L。

所述的壯苗培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA0.5mg／L+NAA0.1mg／L，MS+6-BA1.0mg／L+NAA0.1mg／L或MS+6-BA2mg／L+NAA0.2mg／L。

所述的壯苗培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+6-BA1.0mg／L+NAA0.1mg／L。

所述的生根培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+NAA0.1mg/L，MS+NAA0.5mg／L或MS+NAA1mg/L。

所述的生根培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分優(yōu)選MS+NAA0.5mg／L。

小芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、壯苗培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基還包括基本成分，該基本成分包括蔗糖30g/L、瓊脂6g/L，上述培養(yǎng)基的pH值控制在5.8。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過組培技術(shù)，極大提高繁殖速度和苗的整齊度，更好地保持原有的母本性狀，移栽成活率高達95％。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。

實施例1

無菌材料的獲得