[發明專利]一種注射用烏頭提取物的制備方法

無效

• 申請號: 201410024866.6
• 申請日: 2014-01-20
• 公開（公告）號: CN103768173A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 周彬彬;金郁;柯燕雄;傅青
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: A61K36/714
• 分類號: A61K36/714
• 代理公司: 上海三和萬國知識產權代理事務所(普通合伙) 31230
• 代理人: 朱小晶

1.一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，其具體步驟為：

(1)超聲提取：將烏頭藥材粉碎后加入乙醇水溶液超聲提取兩次，合并兩次提取液，蒸至無醇味；

(2)有機相萃取：直接向步驟(1)所得的提取液中加水補充至固體充分溶解，滴加氨水調堿性；加入有機溶劑萃取，合并有機相溶液蒸干；

(3)反相色譜純化：將步驟(2)所得的固體殘余物加入有機溶劑和水的混合溶液重溶，進行反相色譜純化；上樣量與填料的質量比為1∶30～1∶100；依次用洗脫液進行三次梯度洗脫，每次洗脫體積為2～4倍柱體積；取第二次洗脫液減壓濃縮，得到生物堿組分；

(4)水解炮制：直接向步驟(3)所得的生物堿組分中加水，超聲至固體完全溶解，滴加氨水調堿性，回流煮沸，冷卻，冷凍干燥得到注射用烏頭提取物。

2.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(1)中，所述的乙醇水溶液的體積濃度為75～100％，用量為6～10倍量(w∶v)；

所述的提取時間為每次1～3小時。

3.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(2)中，所述的堿性條件為pH8～10，有機溶劑為乙酸乙酯，環己烷，二氯甲烷中的一種；

所述的有機相與水相體積比為1∶1～1∶1.5，萃取2～4次。

4.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(3)中，所述的有機溶劑可為甲醇、乙醇或者乙腈中的一種。

5.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(3)中，所述的洗脫液有機相的體積分數為第一次10％～20％，第二次20％～60％，第三次100％。

6.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(3)中，所述的反相色譜填料粒徑為5～60μm。

7.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(4)中，所述的水溶液用量為400～600倍量(w∶v)。

8.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(4)中，所述的水解炮制堿性條件為pH8～10。

9.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(4)中，所述的水解溫度為60～100℃恒溫環境，水解時間為20min～3h。

10.如權利要求1所述的一種注射用烏頭提取物的制備方法，其特征在于，在所述的步驟(4)中，所述的注射用烏頭提取物采用外標法，測得單酯型生物堿含量以苯甲酰烏頭堿，苯甲酰中烏頭堿和苯甲酰次烏頭堿的總量計大于20％，雙酯型生物堿含量以烏頭堿，中烏頭堿和次烏頭堿的總量計小于4％。另有水解生成的胺醇型生物堿和中間產物焦烏頭堿。