[發明專利]一種嗜熱堿性重組含錳過氧化氫酶及其表達載體和工程菌有效
| 申請號： | 201410023123.7 | 申請日： | 2014-01-17 |
| 公開（公告）號： | CN103725699A | 公開（公告）日： | 2014-04-16 |
| 發明（設計）人： | 趙志軍;史吉平;孫俊孫;何曉娟 | 申請（專利權）人： | 中國科學院上海高等研究院 |
| 主分類號： | C12N15/53 | 分類號： | C12N15/53;C12N9/08;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海光華專利事務所 31219 | 代理人： | 張艷 |
| 地址： | 201210 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 堿性 重組 過氧化氫酶 及其 表達 載體 工程 | ||
1.一種重組含錳過氧化氫酶的多核苷酸，其序列如SEQ?ID?No：1所示。
2.一種重組含錳過氧化氫酶，由權利要求1所述的多核苷酸序列編碼。
3.一種重組含錳過氧化氫酶表達載體，包含如權利要求1所述的重組含錳過氧化氫酶的多核苷酸序列。
4.如權利要求3所述的重組含錳過氧化氫酶表達載體，其特征在于，所述表達載體為pET系列表達載體。
5.如權利要求4所述的重組含錳過氧化氫酶表達載體，其特征在于，所述pET系列表達載體為pET28a(+)。
6.一種工程菌，所述工程菌由權利要求3-5任一權利要求所述的重組含錳過氧化氫酶表達載體轉化獲得。
7.如權利要求6所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌由權利要求3-5任一權利要求所述的重組含錳過氧化氫酶表達載體轉化大腸桿菌獲得。
8.如權利要求7所述的工程菌，其特征在于，所述大腸桿菌為大腸桿菌BL21(DE3)。
9.一種重組含錳過氧化氫酶的制備方法，包括如下步驟：將權利要求6-8任一權利要求所述的工程菌在LB培養基中活化過夜后，轉接至TB培養基中，添加MnCl2和IPTG，再誘導培養。
10.一種工程菌，所述工程菌由權利要求3-5任一權利要求所述的重組含錳過氧化氫酶表達載體和錳離子轉運蛋白Mnt?H表達載體轉化獲得。
11.如權利要求10所述的工程菌，其特征在于，所述錳離子轉運蛋白Mnt?H表達載體采用pACYCDuet-1。
12.如權利要求10所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌由權利要求3-5任一權利要求所述的重組含錳過氧化氫酶表達載體和錳離子轉運蛋白Mnt?H表達載體轉化大腸桿菌獲得。
13.如權利要求12所述的工程菌，其特征在于，所述大腸桿菌為大腸桿菌BL21(DE3)。
14.一種重組含錳過氧化氫酶的制備方法，包括如下步驟：將權利要求10-13任一權利要求所述的工程菌在LB培養基中活化過夜后，轉接至含有Kan和Cm的TB培養基中，添加IPTG，同時添加MnCl2，再誘導培養。
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