[發(fā)明專利]一種脂肽定量檢測的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410020263.9
• 申請日: 2014-01-16
• 公開（公告）號: CN103760268A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 牟伯中;楊世忠;劉金峰;剛洪澤;孟勇
• 申請（專利權(quán)）人: 華東理工大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 上?？剖⒅R(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 蔣亮珠

1.一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，包括以下步驟：1)待檢樣品分離獲得脂肽；2)脂肽與熒光標(biāo)記物反應(yīng)得到熒光標(biāo)記的脂肽；3)熒光標(biāo)記的脂肽利用高效液相色譜檢測；4)由色譜峰面積計(jì)算脂肽含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，步驟1)待檢樣品分離獲得脂肽是在待檢樣品中加6M鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH＝2.0，然后乙醚萃取，萃取液除去乙醚獲得脂肽。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，步驟2)所述的熒光標(biāo)記物為4-溴甲基-7-甲氧基香豆素。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，所述的待檢樣品中脂肽濃度在0.1ppm～1ppm、1ppm～100ppm和100ppm～600ppm時(shí)，4-溴甲基-7-甲氧基香豆素的加入量分別為0.1mg、1mg和2mg。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，所述的熒光標(biāo)記物與脂肽反應(yīng)在有機(jī)溶劑中進(jìn)行，所述有機(jī)溶劑選自乙腈、丙酮或四氯化碳中的一種。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑為乙腈。

7.根據(jù)權(quán)利要求1～6中任一所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，所述的熒光標(biāo)記物與脂肽反應(yīng)在催化劑下進(jìn)行，催化劑選自Na₂CO₃、吡啶或三乙胺中的一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，所述的催化劑為三乙胺，三乙胺加入量為100μL。

9.根據(jù)權(quán)利要求1～8中任一所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，所述的熒光標(biāo)記物與脂肽反應(yīng)的溫度為40℃～80℃，反應(yīng)時(shí)間為10min～30min。

10.根據(jù)權(quán)利要求9中任一所述的一種脂肽定量檢測的方法，其特征在于，所述的熒光標(biāo)記物與脂肽反應(yīng)的溫度為60℃，反應(yīng)時(shí)間為20min。