[發(fā)明專利]雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410018289.X
• 申請(qǐng)日: 2014-01-15
• 公開（公告）號(hào): CN103882094B
• 公開（公告）日: 2016-11-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳亮;張宏福;侯小峰;付生慧;何科林
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號(hào): C12Q1/34
• 分類號(hào): C12Q1/34
• 代理公司: 北京科迪生專利代理有限責(zé)任公司 11251
• 代理人: 盧紀(jì);顧煒

1.雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法，其特征在于實(shí)現(xiàn)步驟如下：

（1）選取目標(biāo)的雞飼料，并在所述雞飼料中添加多種已知類型的外源碳水化合物酶，每種外源碳水化合物酶的添加劑量設(shè)置系列的濃度梯度；

（2）將已知重量的加酶雞飼料樣品置于三角瓶中，并加入已知配比的模擬胃消化的緩沖液和消化酶液，混合均勻，其中飼料、緩沖液和消化酶液的重量百分比范圍是2：6：1～2：10：1，并在設(shè)定的模擬胃消化參數(shù)下將雞飼料樣品進(jìn)行模擬胃的消化過程；

（3）待模擬胃消化結(jié)束后，在三角瓶中加入已知配比的模擬小腸消化的緩沖液和消化酶液，其中緩沖液和消化酶液的重量百分比范圍是19：1～21：1，并繼續(xù)在設(shè)定的模擬小腸消化參數(shù)下將雞飼料樣品進(jìn)行模擬小腸的消化過程；

（4）待模擬小腸消化結(jié)束后，將消化殘?jiān)娓芍梁阒兀瑴y(cè)定殘?jiān)w外消化能值，計(jì)算出添加每種碳水化合物酶的雞飼料體外消化能值，并根據(jù)碳水化合物酶和體外消化能值的回歸關(guān)系，得出每種碳水化合物酶能提高目標(biāo)的雞飼料體外消化能值的臨界點(diǎn)；

（5）將每種碳水化合物酶依據(jù)所述臨界點(diǎn)進(jìn)行編碼，采用回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)，以體外消化能值為特征指標(biāo)，篩選外源碳水化合物酶的最優(yōu)酶譜。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法，其特征在于：所述步驟（1）中目標(biāo)的雞飼料中添加3～7種外源碳水化合物酶，添加劑量設(shè)置0～1000μg/g系列濃度梯度。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法，其特征在于：所述步驟（2）中模擬胃消化的緩沖液為：pH為2.0，摩爾質(zhì)量比90：8～100：11=氯化鈉：氯化鉀的混合緩沖溶液；模擬胃消化的酶液為：pH2.0的900～1500U/mL胃蛋白酶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法，其特征在于：所述步驟（2）中模擬胃消化參數(shù)為：溫度40～42℃，搖床轉(zhuǎn)速120～180rpm，消化時(shí)間4～6h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法，其特征在于：所述步驟（3）中模擬小腸消化的緩沖液為：pH為6.3～6.6，摩爾質(zhì)量比90：18：152～98：22：186=氯化鈉：氯化鉀：磷酸鹽的混合緩沖溶液；模擬小腸消化的酶液為：pH6.3～6.6，單位酶活力比37：8：386：1～46：12：464：2=胰蛋白酶：糜蛋白酶：淀粉酶：脂肪酶的混合酶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法，其特征在于：所述步驟（3）中模擬小腸消化的參數(shù)為：溫度40～42℃，搖床轉(zhuǎn)速120～180rpm，消化時(shí)間15～18h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的雞飼料外源碳水化合物酶譜的篩選方法，其特征在于：所述步驟（5）中將每種碳水化合物酶依據(jù)所述臨界點(diǎn)進(jìn)行編碼時(shí)，根據(jù)添加的多種碳水化合物酶的種類，設(shè)置對(duì)應(yīng)數(shù)量的影響因子，每個(gè)影響因子設(shè)置5個(gè)水平，采用回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計(jì)分析體外消化能值，并利用體外消化能值與碳水化合物酶添加劑量關(guān)系，表征出最優(yōu)的碳水化合物酶譜。