[發明專利]一種快速檢測食品中磺胺殘留量的方法

有效

• 申請號: 201410014635.7
• 申請日: 2014-01-14
• 公開（公告）號: CN103760141A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 楊亞玲;于芳;趙嬌
• 申請（專利權）人: 昆明理工大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于食品安全檢測技術領域，涉及食品中殘留磺胺的檢測方法，特別是涉及熒光衍生及濁點萃取的方法。

背景技術

牛奶、肉制品等動物源食品普遍含有蛋白質、脂肪、氨基酸、糖類、鈣、磷、鐵等豐富的營養物質，隨著人民生活水平的不斷提高，其在居民的膳食結構中所占比重也越來越大。磺胺類藥物因其具有其廉價、療效高、療程短等優點，廣泛應用于畜牧業生產中，用于預防和治療畜禽疫病。磺胺類藥物的大量使用導致其在多數動物源食品中均有殘留，人們食用磺胺類藥物殘留量超標的動物源食品后，會對人體健康造成危害。為了避免消費者受到磺胺類藥物殘留的危害，各國都有相應法規規定最高殘留量的標準。歐盟規定牛奶、肉類等食品中磺胺類藥物的殘留限量為100μg?kg^?1。

現有技術中，已應用于磺胺類藥物殘留檢測的技術主要有微生物檢測法如TTC法，免疫分析法如ELISA檢測法，色譜檢測法如HPLC、GC法等。上述方法在檢測精密度等方面各有所長，有的靈敏度低、選擇性差；有的操作過程步驟較為繁瑣，有的需購置昂貴儀器，但大都存在檢測耗時長、成本高的缺點，在具體實際應用中造成不便。

濁點萃取法使用表面活性劑來對樣品中的分析物進行提取，不使用或只使用少量的有機溶劑，是一種對環境友好的樣品前處理方法。本發明采用了壬基酚聚氧乙烯醚NP-7為表面活性劑，其在紫外燈下無熒光強度，不會干擾目標物質的測定，與傳統的萃取劑相比有更溫和的操作條件和較高檢測靈敏度、快速、準確等特點。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種快速檢測食品中的磺胺殘留量的方法，這是一種有效的新型濁點萃取體系分離富集并結合薄層板檢測食品中磺胺殘留量的方法，在保證檢測準確度和安全性的同時，降低了檢測成本，為質監部門提供了一種準確，方便快捷，直觀定性定量的測定方法。

本發明快速檢測食品中的磺胺殘留量的方法包括以下步驟：

（1）樣品處理：在含有磺胺殘留食品加入溶劑，混勻，離心，取出上清液，備用；?

（2）磺胺熒光衍生物的形成及濁點萃取：配制磺胺濃度0.1～100mg/L的標準水溶液，加入質量體積百分比濃度為0.05%(w/v)的熒光胺甲醇液，用pH緩沖液調節體系至pH3～5，在常溫下反應30min，加入非離子表面活性劑及無機鹽，渦旋混合2?min，35℃下加熱20min，離心分相，去掉上層水相，得到標準品富集相，其中熒光胺甲醇液的添加量為0.1～0.5mL/5mL；

（3）樣品磺胺熒光衍生物的形成及濁點萃取：取步驟（1）所得上清液，按照步驟（2）所述的條件進行衍生反應及濁點萃取，得到樣品富集相；

（4）磺胺含量判斷：在長度≥3cm的薄層硅膠板上點樣步驟（2）的標準品富集相和步驟（3）的樣品富集相，待溶劑揮干后，在波長365nm紫外燈下對兩者的熒光強弱進行比較，磺胺本身在紫外燈下沒有熒光，衍生后的磺胺為黃綠色，將樣品富集相的黃綠色熒光強度與標準品富集相的黃綠色熒光強度比較，判斷磺胺的濃度范圍。

步驟（1）中磺胺包括磺胺嘧啶鈉SD、磺胺甲基嘧啶SM1、磺胺二甲基嘧啶SM2、磺胺甲惡唑SMZ、磺胺胍SG中的一種或者幾種；溶劑為三氯乙酸、無水乙醇、乙腈、甲醇、水中的一種，用量為0.08～0.4mL/mL或0.1～5mL/g。

步驟（2）中pH緩沖液調節體系為硼酸、乙酸以及磷酸按常規方法配制成的三酸緩沖溶液；非離子表面活性劑為壬基酚聚氧乙烯醚（7）醚，即NP-7，用量為0.01～0.2mL/5mL；所述無機鹽包括氯化鈉、硫酸鈉、硫酸銨、氯化銨之一種，用量為0.05～0.3g/5mL。

本發明中所述離心條件為離心時間10～20min，離心速率3000～6000r/min。

步驟（4）所述薄層硅膠板上點樣量為30μL，所述樣品富集相與標準品富集相點樣量相同，樣點大小保持一致，直徑在0.2～0.6cm，點樣分6次完成。

同現有技術相比，本發明具有以下優點或者積極效果：