[發明專利]多肽、蛋白質PEG修飾劑合成方法

有效

• 申請號: 201410013357.3
• 申請日: 2014-01-13
• 公開（公告）號: CN104774161B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 羅前東;胡德銀
• 申請（專利權）人: 成都福瑞康生物科技有限公司
• 主分類號: C07C271/16
• 分類號: C07C271/16;C07C269/04
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 吳開磊

技術領域

本發明涉及醫藥領域，為多肽藥物的間隔劑，提高多肽藥物的溶解性。多肽和蛋白經PEG修飾后可以降低它們的免疫原性；保護由RES系統吸收的中介體；阻止蛋白水解酶的識別和降解；并且能增加多肽的表面積，因此降低腎臟的過濾，改變生物分布，具體涉及到R-NH-PEGn-OH合成路線和精致方法。

技術背景

PEG修飾技術從70年代已經開始，起初是對蛋白模型的任一位置進行氨基的PEG修飾，目前FDA已經批準22種經PEG化的藥物上市，且還有多個品種處于臨床研究階段，這些年已經提出了許多PEG修飾方法，最近研究比較熱門的是修飾位點的選擇，第二代PEG修飾劑多為一端是氨基，另外一端是羧基的非天然氨基酸。目前我國處于三期臨床階段第四代長效抗艾新藥艾拉博特(專利ZL03816434.5)，就在多肽的藥物的某個氨基酸通過Fmoc-NH-PEG2-OH與馬來酰亞胺丙酸耦合與gp41肽片斷和修飾。表一：

表1gp41肽片斷和修飾的類似物

在以上多肽中都運用到PEG修飾劑Fmoc-NH-PEG2-OH

經PEG化的藥物往往具有以下優點：(1)更長的半衰期；(2)較低的最大血藥濃度；(3)血藥濃度波動較?。?4)較少的酶降解作用；(5)較少的免疫原性及抗原性；(6)較小的毒性；(7)更好的溶解性；(8)用藥頻率減少；(9)提高病人的依從性，提高生活質量；(10)脂質體對腫瘤有更強的被動靶向作用。PEG化對藥物而言，具有“點石成金”的效果。

發明內容

本發明R-NH-PEGn-OH涉及到產品有：

Fmoc-PEG3-CH2COOH Fmoc-PEG3CH2CH2COOH…Fmoc-PEGnCH2CH2COOH；

Boc-PEG3-CH2COOH Boc-PEG3CH2CH2COOH…Boc-PEGnCH2CH2COOH；

Cbz-PEG3-CH2COOH Cbz-PEG3CH2CH2COOH…Cbz--PEGnCH2CH2COOH

本發明以廉價的二甘醇胺(簡稱DEG)為起始原料，對氨基進行保護，所用到的保護劑有(Boc₂o or Cbz-osu)，得到中間體2R₁-二甘醇胺(以下簡稱R₁-DEG)，R₁-DEG與甲基磺酰氯反應得到中間體3R₁-NH-DEG-MS；取乙二醇或三甘醇或四甘醇在鈉氫的催化條件下與中間體3反應得到中間體4R₁-NH-PEGn(“n”的數值取決于您最終產品PEG的個數)，R₁-NH-PEGn在鈉氫的催化下與溴乙酸或者溴丙酸反應得到R₁-NH-PEG-CH2COOH或R₁-PEG-CH2CH2COOH。再脫保護基，與Boc₂O＼Fmoc-OSU＼Cbz-OSU在堿水條件下反應得R-NH-PEG-CH2CH2COOH見路線二

關于此類化合物近年來的研究很多，如Hoffmann-Roeder[European Journal of Organic Chemi stry；nb.20-21；(2011)；p.3878-38871]以及ARDELYX，INC.[WO2012／6474]都有類似化合物的合成報道，均是由以PEGn做原料，“n”代表乙二醇的數量，在金屬鈉的催化作用下與丙烯酸叔丁酯反應，得到PEG-CH2COOTBU，接著將底物上另一醇羥基做成甲磺酸酯或對甲苯磺酸酯，再與疊氮鈉在DMF中加熱反應上疊氮基，經氫化，水解后上相應的保護基得產品。由于其采用的試劑疊氮鈉劇毒且易爆，屬于高危險品，使得此方法在大規模生產上的應用受限。

相對于路線一，我們改用二甘醇胺為起始原料，先上Boc保護氨基，進而成甲磺酸酯在鈉氫作用下與多聚乙醇反應，增加乙二醇鏈單元，然后與溴丙酸作用，再水解，脫保護，上各種保護基得相應產品。

此路線完全避開了路線一的不足，采用更為安全，環保的試劑，后處理方便，適合工業化生產。

路線一、

路線二：

具體實施方案

實施例1