[發明專利]一種苯甲酸衍生物的制備方法

有效

• 申請號: 201410012864.5
• 申請日: 2014-01-10
• 公開（公告）號: CN103757068A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 陳振明;朱兆火;周碩;張雙玲;李子劍;賴敦岳;李偉
• 申請（專利權）人: 浙江臺州清泉醫藥化工有限公司;杭州師范大學;江蘇清泉化學有限公司
• 主分類號: C12P13/00
• 分類號: C12P13/00;C12P7/62
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;歐穎

1.一種苯甲酸衍生物的制備方法，其特征在于，在包含腈水解酶的酶催化劑作用下，含水反應混合物中的苯甲腈衍生物水解生成所述苯甲酸衍生物。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述腈水解酶為GenBank中編號為ABD98457.1的氨基酸序列；或者是在保持或提高所述腈水解酶活性的前提下，插入、缺失或替換ABD98457.1氨基酸序列中的一個或數個氨基酸所獲得的氨基酸序列，或在ABD98457.1氨基酸序列的基礎上加入標簽或多肽等常規方法進行修飾而得到的氨基酸序列，或由基因庫中搜索或常規突變方法得到的與ABD98457.1氨基酸序列相似度在80%以上的氨基酸序列。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述酶催化劑為游離的腈水解酶、含腈水解酶的菌體細胞、固定在支持物上的腈水解酶、和固定在支持物上的含腈水解酶的菌體細胞中的一種或多種。

4.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述腈水解酶從天然菌敏捷食酸菌72W中獲取，或者所述腈水解酶為將GenBank中編號為DQ444267.1的堿基序列或者可翻譯成權利要求2所述氨基酸序列的堿基序列連接至載體上并轉化進入微生物宿主細胞后表達得到；所述微生物宿主細胞選自：叢毛單胞菌、棒狀桿菌、短桿菌、紅球菌、固氮菌、檸檬酸桿菌、腸桿菌、梭狀芽孢桿菌、克雷白氏桿菌、沙門氏菌、乳酸桿菌、曲霉、糖酵母、接合酵母、畢赤酵母、克魯維酵母、假絲酵母、漢森氏酵母、杜氏藻、德巴利民酵母、毛霉菌、球擬酵母、甲基桿菌、芽孢桿菌、埃希氏桿菌、假單胞菌、根瘤菌和鏈霉菌，優選大腸桿菌。

5.根據權利要求1～4中任意一項所述的方法，其特征在于，所述方法還包括將催化反應完成后得到的反應混合物除去催化劑后加鹽酸酸化并在0～20℃下結晶，得到所述苯甲酸衍生物。

6.根據權利要求1～4中任意一項所述的方法，其特征在于，所述反應混合物中苯甲腈衍生物的濃度為5mM～2M。

7.根據權利要求1～4中任意一項所述的方法，其特征在于，所述反應混合物中產生的苯甲酸衍生物的濃度為0.02～90wt%，優選為0.02～40wt%。

8.根據權利要求1～4中任意一項所述的方法，其特征在于，所述反應混合物的pH值保持在5.0～10.0，優選5.5～8.0；反應溫度為0～65℃，優選5～35℃。

9.根據權利要求1～4中任意一項所述的方法，其特征在于，所述酶催化劑在所述反應混合物中的量為0.1～250g/L，優選1～50g/L。

10.根據權利要求1～9中任意一項所述的方法，其特征在于，所述苯甲腈衍生物為對氨甲基苯甲腈和/或對氯甲基苯甲腈。