[發(fā)明專利]膠原基復(fù)合止血粉劑及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410009613.1
• 申請(qǐng)日: 2014-01-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103721247A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 但年華;劉新華;但衛(wèi)華;馬文杰;富勇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京華信佳音醫(yī)療科技發(fā)展有限責(zé)任公司;四川大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K38/39
• 分類號(hào): A61K38/39;A61K38/48;A61P7/04;A61K31/785
• 代理公司: 成都科海專利事務(wù)有限責(zé)任公司 51202
• 代理人: 鄧?yán)^軒

1.一種膠原基復(fù)合止血粉劑的制備方法，其特征在于該方法包括以下步驟：

1）三七素的制備

在超聲波頻率均為20～40kHz，功率為50～120w，將三七粉100份浸漬在濃度為75～95wt%的乙醇溶液10～20倍中15～20h，再重復(fù)浸漬在濃度為75～95wt%的乙醇溶液5～10倍中5～10h，靜置0.5～1.0h分離，合并兩次浸漬液，留作它用；殘?jiān)栏桑尤?0～15倍的水浸提15～20h；再用5～10倍水重復(fù)浸提6～10h，離心分離得到濾液，將濾液直接經(jīng)過(guò)葡聚糖凝膠柱和0001×7離子交換樹(shù)脂進(jìn)行過(guò)濾層析，流速為0.5～3ml/min，合并濾液，用3～7%的活性炭除色，再將濾液減壓濃縮，噴霧干燥制得三七素粉末；

2）膠原基復(fù)合止血粉的制備

（1）三七素改性I型膠原的制備：

將1～2重量份的I型膠原溶解于在濃度為0.0500.5M的醋酸溶液100重量份中，配制成濃度為1～2wt%的膠原溶液；將三七素0.05～0.5份加入到上述膠原溶液中，使得三七素與I型膠原的質(zhì)量比為0.5～2∶8～9.5，于溫度4-10℃，攪拌2～10h，得到復(fù)合母液A；

（2）多聚賴氨酸修飾殼聚糖的制備：

將1～3重量份脫乙酰度50%～95%的殼聚糖溶解在濃度為0.05～0.5M的醋酸溶液100重量份中，配制成濃度為1%～3wt%的溶液；再將0.1～3重量份的多聚賴氨酸加入到上述溶液中，使其多聚賴氨酸濃度為0.1～3wt%，在室溫下攪拌10～60min，得到復(fù)合母液B；

（3）膠原基復(fù)合海綿的制備：

將0.5～1.0重量份的醫(yī)用明膠溶解在濃度為0.05～0.5M的醋酸溶液100重量份中，配制成0.5%～1.0wt%的溶液，得復(fù)合母液C；再將上述復(fù)合母液A、復(fù)合母液B和復(fù)合母液C按質(zhì)量比為0.5～1∶2～8∶8～2共混，在溫度4-10℃，攪拌8～10h，冷凍干燥得到復(fù)合海綿；

（4）復(fù)合海綿的改性及膠原基復(fù)合止血粉的制備：

在超聲波頻率均為20～40kHz，功率為50～120w，將上述復(fù)合海綿浸漬在濃度為10mmol～50mmol或0.01～10%的改性劑100重量份中0.5～10h，用超純水反復(fù)清洗，繼續(xù)在上述超聲波條件下，再將復(fù)合海綿浸漬于濃度為100～500U/ml或10～50mmol/L的凝血因子100重量份中0.5～1h，最后經(jīng)冷凍干燥、粉碎機(jī)粉碎，用劑量為6～30KGy⁶⁰Co消毒滅菌，成型包裝，獲得膠原基復(fù)合止血粉劑。

2.如權(quán)利要求1所述膠原基復(fù)合止血粉劑的制備方法，其特征在于所述I型膠原是從豬皮、豬腱、牛皮、牛腱、驢皮、鼠皮或鼠尾腱中的任一種。

3.如權(quán)利要求1所述膠原基復(fù)合止血粉劑的制備方法，其特征在于改性劑為戊二醛、甲醛、甲基乙二醛、碳化二亞胺、京尼平、環(huán)氧化合物、鋁鈦金屬配合物和琥珀酸酐中的至少一種。

4.如權(quán)利要求1所述膠原基復(fù)合止血粉劑的制備方法，其特征在于凝血因子為凝血酶、纖維蛋白原、纖連蛋白和氯化鈣中的至少一種。

5.如權(quán)利要求1所述膠原基復(fù)合止血粉劑的制備方法，其特征在于殼聚糖的脫乙酰度為50～95%。

6.如權(quán)利要求1所述膠原基復(fù)合止血粉劑的制備方法制備得到的膠原基復(fù)合止血粉劑，其性能符合以下要求：

（1）氯化鈉含量：≤3%(m/m)；

（2）重金屬含量：≤10μg/g(m/m)；

（3）羥脯氨酸含量：不小于總蛋白含量的8%（m∕m）；

（4）粒度：10～120目；

（5）細(xì)胞毒性：細(xì)胞毒性反應(yīng)不大于1級(jí)。