[發明專利]一種抗鴨病毒性肝炎山豆根多糖及其分子修飾物

有效

• 申請號: 201410009323.7
• 申請日: 2014-01-09
• 公開（公告）號: CN103739733A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 劉家國;陳云;熊文;曾玲;徐美云;王德云;胡元亮;武毅;黃兵;馬秀麗
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P31/14
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1.一種抗鴨病毒性肝炎山豆根多糖硫酸化分子修飾方法，采用氯磺酸-吡啶法硫酸化分子修飾山豆根多糖。?

(1)采用水煎醇沉法，收集不同醇沉部位山豆根多糖，以其添加于飲水中治療鴨肝炎病毒DHV-1攻毒鴨，數次臨床試驗發現山豆根多糖酒精濃度65％醇沉部分(BSRPS65)對鴨病毒性肝炎有較理想的治療效果。?

(2)將帶有攪拌裝置的三頸燒瓶置于冰中，加入無水吡啶20mL，劇烈攪拌，使之充分冷卻，按氯磺酸-吡啶的配比將氯磺酸逐滴緩慢加入，冷卻后于65～95℃水浴鍋上融化成淡黃色液體。稱取抗鴨病毒性肝炎山豆根多糖活性部位(BSRPS₆₅)300mg，加入酯化試劑，在一定溫度下反應適當時間。反應結束后立即加入100mL冰水，用飽和氫氧化鈉溶液(20.0mo1.L^-1)調pH至7后放入透析袋中，用自來水流水透析2d、蒸餾水流水透析1d，將透析袋中的硫酸化多糖濃縮并冷凍干燥后得硫酸化山豆根多糖。?

(3)上述方法硫酸化分子修飾山豆根多糖的條件為：反應溫度65℃～95℃、反應時間1～3h、氯磺酸-吡啶的配比為1∶5～9。?

(4)按照上述方法硫酸化分子修飾山豆根多糖的最佳條件為：反應溫度95℃、反應時間2h、氯磺酸-吡啶的配比為1∶5。?

(5)在最佳條件下硫酸化分子修飾山豆根多糖，其產物中山豆根多糖硫酸酯總糖含量為83.77％，硫酸根含量為39.33％，產物得率為117.33％。?

(6)在最佳條件下硫酸化分子修飾山豆根多糖，其產物的紅外光譜圖基本形狀與修飾前一致，未發生根本性改變，均具有多糖特征吸收峰，除多糖母體特征峰得到保留之外，在1248cm^-1處出現的吸收峰是由不對稱S=O伸縮振動引起的，在814cm^-1處左右出現了C-O-SO₃相關的對稱性C-O-S吸收峰，表明本法中硫酸化分子修飾山豆根多糖產物為山豆根多糖硫酸酯。?

(7)在最佳條件下制備的山豆根多糖硫酸酯對鴨肝炎病毒DHV-1感染體外培養的鴨胚肝細胞具有良好的抑制作用，且優于未修飾的山豆根多糖。?

(8)在最佳條件下制備的山豆根多糖硫酸酯對鴨肝炎病毒DHV-1攻毒感染引起的鴨病毒性肝炎具有良好的治療作用，其作用優于未修飾的山豆根多糖。?

(9)在山豆根多糖(BSRPS₆₅)及其硫酸酯治療鴨病毒性肝炎的治療劑量分別為4mg/羽和2mg／羽，添加于飲水中，連用3天。?

2.權利要求1所述方法獲得的山豆根多糖硫酸酯能夠明顯提高山豆根多糖抗鴨病毒性肝炎活性部位(BSRPS₆₅)的抗病效果，并具有較高的糖和磷酸根含量高以及產物得率。?