[發明專利]基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法

無效

• 申請號: 201410008389.4
• 申請日: 2014-01-08
• 公開（公告）號: CN103760363A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 曾慶輝;紀文宇
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春光學精密機械與物理研究所
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 長春菁華專利商標代理事務所 22210
• 代理人: 陶尊新

1.一種基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法，其特征在于，包括如下：

步驟一：制備核殼量子點；

步驟二：將步驟一得到的核殼量子點與蛋白G或蛋白A通過EDC縮合的方式進行共價連接，得到共價連接產物；

步驟三：將步驟二得到的共價連接產物與待檢測抗原分子的一個抗體分子混合，得到量子點抗體柔性偶聯的標記產物；

步驟四：將步驟三得到的量子點抗體柔性偶聯的標記產物涂在玻璃纖維素膜上，得到涂有標記產物的玻璃纖維素膜，將待檢測抗原分子的另一個抗體和二抗分別噴涂在硝酸纖維素膜上形成測試帶和控制帶，得到已平行包被抗體的硝酸纖維素膜；

步驟五：在單面聚酯或塑料板上，依次粘貼上玻璃纖維素濾膜、涂有標記產物的玻璃纖維素膜、吸水纖維素膜、已平行包被抗體的硝酸纖維素膜，將粘貼后的聚酯或塑料板制作得到免疫層析試紙條；

步驟六：將步驟五得到的免疫層析試紙條的墊端插入待測樣品溶液中，免疫層析后取出試紙條，確定檢測結果。

2.根據權利要求1所述的一種基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法，其特征在于，所述的核殼量子點為CdTe/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnSe或CdSe/ZnS核殼量子點。

3.根據權利要求1所述的一種基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法，其特征在于，所述的共價連接產物與待檢測抗原分子的一個抗體分子的摩爾比為1：1。

4.根據權利要求1所述的一種基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法，其特征在于，所述的步驟四中，測試帶和控制帶平行設置，測試帶和控制帶的間隔為8-12mm。

5.根據權利要求1所述的一種基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法，其特征在于，所述的將待檢測抗原分子的另一個抗體和二抗分別噴涂在硝酸纖維素膜上形成測試帶和控制帶后，室溫晾干20-30分鐘后，再放入含有牛血清白蛋白的磷酸鹽緩沖液中封閉60-120分鐘，干燥后封袋，放置4℃保存備用。

6.根據權利要求1所述的一種基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法，其特征在于，所述的待測樣品溶液為血液、尿液或唾液。

7.根據權利要求1所述的一種基于核殼量子點柔性偶聯標記物免疫層析試紙條的檢測方法，其特征在于，所述的步驟六中，免疫層析后取出試紙條后，具體為：將試紙條在紫外燈下肉眼觀察結果，或在熒光光譜儀下獲得檢測光譜曲線，通過與標準曲線對比，確定檢測結果。