[發明專利]一種靶向性抗腫瘤融合蛋白及其編碼基因與表達質粒

有效

• 申請號: 201410006518.6
• 申請日: 2014-01-07
• 公開（公告）號: CN103755813A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 顏宏利;鄧安梅;孫小波;方超平
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C12N15/66;A61K38/16;A61K47/48;A61P35/00
• 代理公司: 上海元一成知識產權代理事務所(普通合伙) 31268
• 代理人: 趙青

技術領域

本發明涉及醫藥生物技術領域，具體涉及一種靶向性抗腫瘤融合蛋白，及其編碼基因、表達質粒與在制備抗腫瘤藥物中的應用。

背景技術

近年來隨著腫瘤遺傳學和分子生物學的深入研究，人們已經找到了一些腫瘤增殖分化、浸潤轉移的重要分子，在此基礎上，靶向藥物治療逐漸成為是目前腫瘤治療的重要手段。與常規的放化療藥物不同，靶向藥物能靶向作用于腫瘤細胞，有針對性的殺傷細胞，從而降低用藥量；尤為重要的是，靶向藥物能夠最大限度的減少對正常細胞或組織的損傷，降低副作用，提高療效和改善病人的生存質量。因此，靶向抗腫瘤藥物的研發成為抗腫瘤藥物的熱點。目前已經有伊馬替尼、厄洛替尼、舒尼替尼、吉非替尼、索拉非尼、達沙替尼、拉帕替尼和尼洛替尼等多種靶向抗腫瘤藥物在臨床得到廣泛應用。

研制腫瘤靶向藥物，靶點的選擇至關重要。近年來的研究發現，磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine，PS）是抗腫瘤治療的重要靶點之一。磷脂酰絲氨酸是磷脂膜的重要組成成分，約占細胞總脂質的2－10%（Vance?JE,Steenbergen?R(2005)Metabolism?and?functions?of?phosphatidylserine.Prog?Lipid?Res44(4):207-234引用方式要求是作者，題名，期刊名，期卷頁碼）。在凝血、細胞吞噬和凋亡等特殊的生理狀態下，磷脂酰絲氨酸外翻，從而容易被吞噬細胞發現和吞噬。而越來越多的研究證實，腫瘤細胞和腫瘤新生血管內皮細胞的磷脂腺絲氨酸也外翻，從而成為腫瘤顯像和靶向治療的重要靶點（Kristof?Schutters,Chris?Reutelingsperger(2010)Phosphatidylserine?targeting?for?diagnosis?and?treatment?of?human?diseases,Apoptosis15:1072-1082）。

目前已經有一些針對磷脂酰絲氨酸的藥物如Diannexin（一種膜聯蛋白A5的同源二聚體，能特異性結合PS）和Bavituximab（PS的單克隆抗體）通過了臨床試驗（http://clinicaltrials.gov）。Diannexin能夠顯著抑制結直腸癌、肺癌移植瘤的生長和腫瘤新生血管的生成（Khalid?Al-Nedawia,Brian?Meehana,RobertS?et?al.(2009)Endothelial?expression?of?autocrine?VEGF?upon?the?uptake?of?tumor-derived?microvesicles?containing?oncogenic?EGFR?PNAS,1063794-3799）。Bavituximab已經完成了小細胞肺癌、肝癌、乳腺癌、前列腺癌等多種腫瘤的臨床試驗，發現Bavituximab和放療聯合使用，能顯著增強放療的效果（Xianming?Huang,Dan?Ye,Philip?E.Thorpe(2011)Enhancing?the?potency?of?a?whole-cell?breast?cancer?vaccine?in?mice?with?an?antibody-IL-2immunocytokine?that?targets?exposed?phosphatidylserine,Vaccine29,4785-4793）。因此，AnnexinA5可以作為一種“生物導彈”研制靶向抗腫瘤藥物。但有一個問題不容忽視：AnnexinA5的分子量為34kDa(GenBank?No.M18366)，所以和腫瘤藥物融合后分子量往往太大，這樣不僅不利于融合蛋白的表達，也導致了其半衰期的縮短。