[發明專利]一種含有雙歧桿菌包埋珠或包埋塊的酸乳及其制備方法

有效

• 申請號: 201410006314.2
• 申請日: 2014-01-07
• 公開（公告）號: CN103749672A
• 公開（公告）日: 2014-04-30
• 發明（設計）人: 邵建寧;張文齊;劉彩云;麻和平;趙昊星;魏亞琴;彭章普
• 申請（專利權）人: 甘肅省科學院生物研究所
• 主分類號: A23C9/123
• 分類號: A23C9/123
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心 62100
• 代理人: 張克勤

1.一種含有雙歧桿菌包埋珠或包埋塊的酸乳，其特征在于：它含有雙歧桿菌包埋珠或包埋塊，雙歧桿菌包埋珠或包埋塊包含雙歧桿菌屬長雙歧桿菌長亞種（Bifidobacterium?longum?subsp.?longum）CGMCC?編號1.2186、長雙歧桿菌嬰兒亞種（Bifidobacterium?longum?subsp.?infantis）CGMCC編號1.2202、青春雙歧桿菌（Bifidobacterium?adolescentis）CGMCC編號?1.2190、短雙歧桿菌（Bifidobacterium?brevis）CGMCC編號1.2213、雙歧雙歧桿菌（Bifidobacterium?bifidum）CGMCC編號1.2212或動物雙歧桿菌（Bifidobacterium?animalis）CGMCC編號1.1852中的一種，雙歧桿菌包埋珠或包埋塊中的雙歧桿菌活菌數不小于1×10⁹?CFU/g。

2.權利要求1所述的一種含有雙歧桿菌包埋珠或包埋塊的酸乳，其特征在于：它為呈球形固態狀的雙歧桿菌包埋珠，直徑為3?mm—12?mm。

3.權利要求1所述的一種含有雙歧桿菌包埋珠或包埋塊的酸乳，其特征在于：它為呈方形固態狀的雙歧桿菌包埋塊，長度為3—12?mm，寬度為3—12?mm，高度為3—12?mm。

4.權利要求1所述的一種含有雙歧桿菌包埋珠或包埋塊的酸乳的制備方法，其特征在于它包括以下步驟：

（1）雙歧桿菌包埋珠或包埋塊的制備

A、菌種活化試管培養?

菌種活化前，在無菌室將零下18℃—4℃溫度下保存的雙歧桿菌安瓿瓶在室溫下放置2?h—3?h，然后將安瓿瓶消毒，打開安瓿瓶，用無菌吸管吸取0.2?mL—0.5?mL的培養基加入安瓿瓶內，將安瓿瓶內菌物，按體積百分比為2％—5％的接種量接種于培養基中，試管培養，在厭氧條件下，于30℃—42℃的溫度下培養20?h—48?h后，終止培養；以相同接種量、培養條件再連續活化2次，獲得三代液體培養物；?

B、三角瓶一級菌種培養

取試管培養三代液體培養物，按體積百分比為2％—5％的接種量，接入三角瓶進行一級菌種液體培養，在厭氧條件下，于30℃—42℃的溫度下培養20h—48h后，終止培養；

C、種子罐二級菌種培養

取三角瓶一級菌種液體培養物，按體積百分比為2％—5％的接種量，接入種子罐進行二級菌種液體培養，在非厭氧條件下，于30℃—42℃的溫度下培養20h—48h后，終止培養；

D、發酵罐培養

將經種子罐二級菌種培養的液體培養物，按體積百分比為2％—5％的接種量，接入發酵罐，在30℃—42℃的溫度下培養，當發酵液pH值低于5.5時，用NaOH溶液調節發酵液pH至6.0—6.5之間，培養20?h—48?h后停止培養；

E、菌體離心收集

設置離心機溫度為0℃—8℃，離心轉速為3000?r/min—9000?r/min、離心時間為10?min—30?min，離心結束后除去上清液，收集沉淀的雙歧桿菌菌體備用；

F、添加保護劑

將離心收集的菌體懸浮于離心前發酵罐培養液原體積1/100—1/10的保護劑中；在零下20℃—10℃的溫度下貯存備用;

G、雙歧桿菌的包埋

將懸浮于保護劑中雙歧桿菌菌體與滅菌包埋材料溶液混合，攪拌均勻后，擠入固化劑，慢速攪拌5min—30min，過濾，用無菌水洗滌，即得雙歧桿菌包埋珠或包埋塊；

（2）酸乳的制備

H、原料奶預處理：將原料奶預熱至65℃—70℃的溫度，打開攪拌機，將蔗糖加入熱奶中，全部化開時，用200目過濾布進行過濾；原料奶預熱后均質，均質壓力為18Mpa—20?Mpa；然后殺菌，殺菌溫度為95℃，時間5分鐘，冷卻至37℃—42℃；

I、接種、發酵：

分為制備凝固形酸乳和攪拌型酸乳兩種，

1）制備雙歧桿菌包埋珠或包埋塊凝固形酸乳：將雙歧桿菌包埋珠或包埋塊與酸乳發酵劑一起加入預處理后的原料奶中，酸乳發酵劑按體積百分比為2％—5％的接種量接種，雙歧桿菌包埋珠按預處理后原料奶重量的5—25%的量加入，混合均勻后分裝發酵，在37℃—43℃的溫度下培養，酸乳滴定酸度到達70—80潔爾涅爾度，終止發酵即得凝固形酸乳；

2）制備雙歧桿菌包埋珠或包埋塊攪拌型酸乳：將酸乳發酵劑按體積百分比為2％—5％的接種量接種于預處理后的原料奶中發酵，于37℃—42℃溫度下培養發酵，酸乳滴定酸度到達70—80潔爾涅爾度，終止發酵;發酵好酸乳冷卻破乳后與雙歧桿菌包埋珠或包埋塊混合即得攪拌型酸乳，其中雙歧桿菌包埋珠或包埋塊按照發酵好酸乳5—30%的質量比加入；?

J、冷藏后熟：將上步驟混合有雙歧桿菌包埋珠或包埋塊的酸乳，冷卻至20℃—25℃溫度后，進入冷藏溫度為0℃—8℃的冷庫，后熟12?h—24?h后，最終得成品。