[發明專利]合歡皮皂苷佐劑及其制備方法和含該佐劑的疫苗制劑及用途

無效

• 申請號: 201410005853.4
• 申請日: 2014-01-03
• 公開（公告）號: CN103768593A
• 公開（公告）日: 2014-05-07
• 發明（設計）人: 孫紅祥
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K36/48;A61P37/04
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 韓介梅

技術領域

本發明涉及從中藥合歡皮中提取分離的具有免疫佐劑作用的合歡皮總皂苷、合歡皮皂苷佐劑活性有效部位A和合歡皮皂苷佐劑活性有效部位B，及其制備方法和含該皂苷佐劑的疫苗制劑，以及它們在制備疫苗制劑中的應用。

背景技術

疫苗接種是預防和控制傳染性疾病最經濟、有效的手段。DNA疫苗、重組疫苗和合成肽疫苗等新型疫苗是近年來發展迅速的一類生物制劑，比常規疫苗具有抗原純度高、特異性強、安全性好等優勢。然而，這些新型疫苗免疫原性弱，免疫效力低下[Oyston?P,?Robinso?K.?The?current?challenges?for?vaccine?development.?J?Med?Microbiol?2012;?61(7):?889-894]。同此，當前疫苗研究正面臨一些復雜病原如瘧疾、結核、人免疫缺陷病毒等的重要挑戰[Leroux-Roels?G.?Unmet?needs?in?modern?vaccinology:?Adjuvants?to?improve?the?immune?response.?Vaccine?2010;?28(Supp.?3):?C25-36]。佐劑是傳統疫苗和當前新型疫苗必不可少的組成成分，不僅能影響機體對疫苗免疫應答的強度，而且能針對特定病原體誘導最有效的免疫應答類型[Mbow?ML,?De?Gregorio?E,?Valiante?NM,?et?al.?New?adjuvants?for?human?vaccines.?Current?Opinion?in?Immunology?2010;?22(3):?411-416]。目前研究的免疫佐劑種類很多，如油佐劑、弗氏佐劑、微生物及其代謝產物、核酸及其類似物、細胞因子、脂質體等[Dey?AK,?Srivastava?IK.?Novel?adjuvants?and?delivery?systems?for?enhancing?immune?responses?induced?by?immunogens.?Expert?Rev?Vaccines?2011;?10:?227-51]，但由于存在不同程度的毒副作用或安全隱患等一些不可避免的缺陷而難以實際應用[Mbow?ML,?De?Gregorio?E,?Valiante?NM,?Rappuoli?R.?New?adjuvants?for?human?vaccines.?Curr?Opin?Immunol?2010,?22(3):?411-6;?Batista-Duharte?A,?Lindblad?EB,?Oviedo-Orta?E.?Progress?in?understanding?adjuvant?immunotoxicity?mechanisms.?Toxicol?Lett?2011;?203(2):?97-105]。鋁膠佐劑自1920s使用以來，直至最近由鋁鹽和TLR4激動劑3-O-去酰基-4’-單磷酰脂質A組成的AS04被批準之前一直是唯一通過FDA批準的人用疫苗佐劑[Marrack?P,?McKee?AS,?Munks?MW.?Towards?an?understanding?of?the?adjuvant?action?of?aluminium.?Nat?Rev?Immunol?2009;?9:?287-293]。然而，鋁膠佐劑存在一些問題：①?主要通過誘導Th2型免疫應答產生抗體起保護作用，不能誘生Th1型免疫應答和細胞介導的免疫反應，只適用于以抗體為主要保護性免疫的疫苗(Exley?C,?Siesjo?P,?Eriksson?H.?The?immunobiology?of?aluminium?adjuvants:?how?do?they?really?work??Trends?Immunol?2010;?31:?103-109)；②?對人免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、單純皰疹病毒、流感病毒以及血吸蟲病、百日咳和傷寒等多種抗原無佐劑作用[O’Hagan?DT,?De?Gregorio?E.?The?path?to?a?successful?vaccine?adjuvant?-?‘the?long?and?winding?road’?.?Drug?Discov?Today?2009;?14:?541–551]；③?可促進IgE抗體產生，容易誘導機體產生過敏反應；④?有局部反應，會形成肉芽腫，極個別可發生局部無菌性膿腫；⑤?因其理化性質特點，含鋁膠疫苗怕凍，凍后鋁膠容易變性；⑥?對人、畜神經系統可能有影響。因此，鋁膠佐劑已遠遠不能滿足新型疫苗發展的要求[Kool?M,?Fierens?K,?Lambrecht?BN.?Alum?adjuvant:?some?of?the?tricks?of?the?oldest?adjuvant.?J?Med?Microbiol?012;?61(7):?927-934]。尋找安全、有效、新型的免疫佐劑是當前疫苗研究領域的一個熱點[Schijns?VEJC,?Lavelle?EC.?Trends?in?vaccine?adjuvants.?Expert?Rev?Vaccines?2011;?10(4):?539-550]。免疫佐劑研究現已被列為疫苗研究的優先領域[Harandi?AM,?Medaglini?D,?Shattock?RJ.?Vaccine?adjuvants:?A?priority?for?vaccine?research.?Vaccine?2010;?28(12):?2363-2366;?Harand?AM?,?Brewe?J,?Schijn?V.?Conference?Scene:?Recent?advancements?in?immunopotentiators?for?modern?vaccines.?Immunotherapy?2011;?3(11):?1297-301]。