[發(fā)明專(zhuān)利]一種春蘭與大花蕙蘭雜交種育苗的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410002480.5
• 申請(qǐng)日: 2014-01-03
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103704130A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫葉;包建忠;劉春貴;李風(fēng)童;馬輝;陶凡;張?zhí)?/a>;張靚;陳秀蘭
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 江蘇里下河地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所
• 主分類(lèi)號(hào): A01H1/02
• 分類(lèi)號(hào): A01H1/02;A01H4/00
• 代理公司: 揚(yáng)州市錦江專(zhuān)利事務(wù)所 32106
• 代理人: 江平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種遠(yuǎn)緣雜交育種和雜交種繁殖方法。

背景技術(shù)

春蘭(Cym.goeringii)，又稱(chēng)草蘭、山蘭、朵朵香。是蘭科，蘭屬，地生蘭類(lèi)多年生草本。是中國(guó)蘭的代表種，原產(chǎn)于我國(guó)長(zhǎng)江流域或西南地區(qū)，日本和朝鮮半島也有分布。春蘭名優(yōu)品種具有很高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，在東南亞特別是日本、韓國(guó)和臺(tái)灣地區(qū)，春蘭十分受歡迎。春蘭傳統(tǒng)的品種選育以綠色為基本，崇尚瓣型和素心，是貫徹執(zhí)行瓣型理論最具代表的國(guó)蘭種，因此流傳至今的名優(yōu)春蘭品種，絕大部分為綠色瓣型花或素心花品種。

大花蕙蘭（Cymbidium?hybridium），又叫喜姆比蘭和蟬蘭。蘭科、蘭屬植物。它是由蘭屬中的大花附生種、小花垂生種以及一些地生蘭經(jīng)過(guò)一百多年的多代人工雜交育成的品種群。大花蕙蘭葉長(zhǎng)碧綠，花姿粗曠，花色艷麗，是世界著名的“蘭花新星”。在國(guó)際花卉市場(chǎng)十分暢銷(xiāo)，深受花卉愛(ài)好者的傾愛(ài)。大花蕙蘭的生產(chǎn)地主要是日本，韓國(guó)和中國(guó)，澳洲及美國(guó)等。

鑒于人們對(duì)新產(chǎn)品和新蘭花的追求，培育更多品種的蘭花種是植物界的研究的一個(gè)課題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是為人們提供一種以春蘭與大花蕙蘭雜交種育苗的方法。

本發(fā)明以春蘭為母本，大花蕙蘭為父本，母本在開(kāi)花2天后去雄，父本取開(kāi)花后3～5天的花粉，通過(guò)人工授粉獲得雜交種，在雜交種的蒴果未開(kāi)裂前采收，經(jīng)表面消毒和種子用營(yíng)養(yǎng)液前處理后進(jìn)行無(wú)菌播種，經(jīng)暗培養(yǎng)種子萌發(fā)、種子直接成苗或原球莖增殖，原球莖再經(jīng)芽誘導(dǎo)、根誘導(dǎo)、組培苗煉苗，然后進(jìn)行溫室栽培。

本發(fā)明針對(duì)春蘭與大花蕙蘭種間雜交育種和種子無(wú)菌播種中，如何提高優(yōu)良品種授粉結(jié)實(shí)率，種子萌發(fā)率、原球莖增殖率、誘芽誘根成苗率和煉苗成活率等，提出一種使雜交成苗快，品質(zhì)好，高效、簡(jiǎn)便、推廣性強(qiáng)的春蘭和大花蕙蘭雜交和無(wú)菌播種育苗方法。

具體方法：

無(wú)菌播種是：將未開(kāi)裂的蒴果表面用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75%的酒精消毒后，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的HgCl水溶液浸泡10分鐘后取出，再浸入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95%的酒精內(nèi)，取出蒴果立即在酒精燈上點(diǎn)燃，待蒴果表面酒精燃燒完后，切開(kāi)蒴果，取出種子，放入裝有營(yíng)養(yǎng)液的玻璃試劑瓶?jī)?nèi)，振蕩10～20分鐘后，將種子用無(wú)菌不銹鋼小勺均勻分散于培養(yǎng)基表面。

種子前處理營(yíng)養(yǎng)液中含有1/2MS、萘乙酸（NAA）0.5mg/l、蔗糖20g/l和蛋白胨0.5g/l，營(yíng)養(yǎng)液的pH值為5.25～5.3；所述無(wú)菌播種培養(yǎng)基中含有1/2MS、萘乙酸（NAA）0.5mg/l、蔗糖20g/l、活性碳0.5g/l、蛋白胨0.5g/l?和瓊脂6g/l，培養(yǎng)基的pH值為5.25～5.3。

暗培養(yǎng)種子萌發(fā)是：將連同培養(yǎng)基的種子置于無(wú)光、培養(yǎng)溫度為23±0.2℃的環(huán)境溫度下放置。

原球莖增殖是：待原球莖萌發(fā)至長(zhǎng)度為2～5mm時(shí)，原球莖材料每隔60天轉(zhuǎn)入一次增殖培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基后將玻璃瓶置于溫度為23±0.2℃的環(huán)境中，并且光照8小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為1500lux±100?lux；所述增殖培養(yǎng)基中含有1/2MS、2,4-D2mg/l、蔗糖20g/l、活性碳0.5g/l、蛋白胨0.5g/l?和瓊脂6g/l，所述增殖培養(yǎng)基的pH值為5.25～5.3。

種子直接成苗是：待原球莖萌發(fā)的幼芽長(zhǎng)度為2～5mm時(shí)，向玻璃瓶?jī)?nèi)轉(zhuǎn)入二次培養(yǎng)基；所述二次培養(yǎng)基中含1/2MS、萘乙酸（NAA）0.5mg/l、蔗糖20g/l、活性碳0.5g/l、蛋白胨0.5g/l?和瓊脂6g/l，二次培養(yǎng)基的pH值為5.25～5.3。

莖誘芽是：待原球莖萌發(fā)的幼芽長(zhǎng)度為1～2cm時(shí)，轉(zhuǎn)入誘芽培養(yǎng)基，置于23±0.2℃的環(huán)境中2～3個(gè)月，期間光照12小時(shí)/天，光照強(qiáng)度為2000lux±100?lux；所述誘芽培養(yǎng)基中含1/2MS、萘乙酸（NAA）0.1mg/l、6-BA1mg/l?、蔗糖20g/l、蛋白胨0.5g/l?和瓊脂6g/l，所述誘芽培養(yǎng)基的pH值為5.25～5.3。

根誘導(dǎo)是：待原球莖萌發(fā)的幼芽長(zhǎng)度為2～3cm時(shí)，向玻璃瓶?jī)?nèi)轉(zhuǎn)入生根壯苗培養(yǎng)，置于23±0.2℃的環(huán)境中，并且光照10小時(shí)/天，光照強(qiáng)度1500lux±100?lux；所述生根壯苗培養(yǎng)基中含1/2MS、萘乙酸（NAA）0.5mg/l、6-BA0.5mg/l?、蔗糖20g/l、蛋白胨0.5g/l?、活性碳0.5g/l?和瓊脂6g/l，所述生根壯苗培養(yǎng)基的pH值為5.25～5.3。