[發(fā)明專利]GL和TCM199作為牛精液稀釋液和冷凍液的配制方法及使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410001099.7
• 申請日: 2014-01-03
• 公開（公告）號: CN103704203B
• 公開（公告）日: 2017-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 桑國俊;邱忠玉;郭海龍;王珂;容維中;保國俊
• 申請（專利權(quán)）人: 甘肅省畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種GL和TCM199作為牛精液稀釋液和冷凍液的配制方法，其特征在于，該GL和TCM199作為牛精液稀釋液和冷凍液的配制方法包括：牛精液稀釋液的配制和牛精液冷凍液的配制；

牛精液稀釋液的配制方法包括以下步驟：

用電子天平稱取TCM199?2克、三羥基氨基甲烷40克、檸檬酸20克、丙酮酸鈉0.1克、果糖5克、80萬單位青霉素鈉1克；

將TCM199、三羥甲基氨基甲烷、檸檬酸、丙酮酸鈉、果糖和80萬單位青霉素鈉裝入1000毫升容量瓶中，加入雙蒸水500毫升搖動(dòng)溶解，待全部固形物溶解后再用雙蒸水定容到1000毫升；

將定容好的牛精液稀釋液進(jìn)行過濾分裝，分裝玻璃瓶必須事先高壓滅菌，分裝量為100毫升～200毫升；

牛精液冷凍液的配制方法包括以下步驟：

冷凍液分為第一液和第二液，第一液直接稀釋鮮精，第二液用于精液平衡；第一液配制方法：準(zhǔn)確抽取牛精液稀釋液25毫升，將其注入100ml燒杯中，再抽取精制卵黃5毫升和甘油0.5毫升，一并加入盛有25ml牛精液稀釋液的燒杯中，用玻璃棒逆時(shí)針攪動(dòng)2分鐘，靜置備用；

第二液配制方法：準(zhǔn)確抽取牛精液稀釋液25毫升，將其注入100ml燒杯中，再抽取精制卵黃5毫升和甘油3毫升，一并加入盛有25ml牛精液稀釋液的燒杯中，用玻璃棒逆時(shí)針攪動(dòng)2分鐘，靜置備用。

2.一種GL和TCM199作為牛精液稀釋液和冷凍液的使用方法，其特征在于，該GL和TCM199作為牛精液稀釋液和冷凍液的的使用方法包括以下步驟：

第一步，首先用電子天平稱取TCM199?2克、三羥基氨基甲烷40克、檸檬酸20克、丙酮酸鈉0.1克、果糖5克、80萬單位青霉素鈉1克；將TCM199、三羥基氨基甲烷、檸檬酸、丙酮酸鈉、果糖和80萬單位青霉素鈉裝入1000毫升容量瓶中，加入雙蒸水500毫升搖動(dòng)溶解，待全部固形物溶解后再用雙蒸水定容到1000毫升；將定容好的牛精液稀釋液進(jìn)行過濾分裝，分裝玻璃瓶必須事先高壓滅菌，分裝量為100毫升～200毫升，依使用量和使用頻率確定配制牛精液稀釋液；

第二步，按照冷凍液分為第一液和第二液，第一液直接稀釋鮮精，第二液用于精液平衡；第一液配制方法：牛精液稀釋液25毫升、精制卵黃5毫升、甘油0.5毫升；第二液配制方法：牛精液稀釋液25毫升、精制卵黃5毫升、甘油3毫升；

第三步，采精，采集健康公牛的新鮮精液；

第四步，初次稀釋，將已經(jīng)預(yù)熱到35℃的第一液按照采精量2.5倍稀釋，保溫箱保存或儲(chǔ)運(yùn)1小時(shí)～2小時(shí)；

第五步，二次稀釋，將第二液預(yù)熱到35℃，加入與初次稀釋時(shí)第一液同樣劑量的第二液到等溫的初次稀釋精液中，混勻后立即裝管制成細(xì)管精液，細(xì)管精液在4℃冷藏箱平衡1.5小時(shí)后進(jìn)行冷凍保存；

第六步，冷凍保存：將平衡好的細(xì)管精液用程序化冷凍儀進(jìn)行冷凍，冷凍結(jié)束后抽檢并移入液氮罐中進(jìn)行保存和使用。