[發(fā)明專利]具有提高的病毒生產(chǎn)能力的細(xì)胞系及其生產(chǎn)方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201380075430.3 | 申請日： | 2013-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN105121634B | 公開（公告）日： | 2019-07-26 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 樸世鎬;李殷妃 | 申請（專利權(quán)）人： | 易木農(nóng)麥克斯有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/44;C12N15/38;C12N7/01 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494 | 代理人： | 陳桉 |
| 地址： | 韓國*** | 國省代碼： | 韓國;KR |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 具有 提高 病毒 生產(chǎn)能力 細(xì)胞系 及其 生產(chǎn) 方法 | ||
1.一種制備細(xì)胞凋亡被抑制的產(chǎn)病毒突變細(xì)胞系的方法，該方法包括突變在產(chǎn)病毒細(xì)胞系中的Bst-2基因以缺乏Bst-2基因的功能，其中所述突變是MDCK Bst-2基因的外顯子1區(qū)域的位置45至48的4個核苷酸缺失；VEROBst-2基因的外顯子1區(qū)域的位置116至127的12個核苷酸缺失；或VEROBst-2基因的外顯子1區(qū)域的位置127至130的1個核苷酸缺失。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述病毒是流感病毒。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述病毒是單純皰疹病毒。
4.如權(quán)利要求2所述的方法，其中所述流感病毒選自Pandemic/H1N1、A/H1N1和A/H3N2組成的組。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中所述Bst-2基因的外顯子1區(qū)域編碼Bst-2蛋白的胞質(zhì)域。
6.一種在具有產(chǎn)病毒能力的細(xì)胞系中缺乏Bst-2基因功能的產(chǎn)病毒突變細(xì)胞系，其中所述突變細(xì)胞系通過缺乏所述Bst-2基因功能而具有增加的病毒生產(chǎn)能力，
其中所述突變細(xì)胞系具有MDCK Bst-2基因的外顯子1區(qū)域的位置45至48的4個核苷酸缺失；VERO Bst-2基因的外顯子1區(qū)域的位置116至127的12個核苷酸缺失；或VERO Bst-2基因的外顯子1區(qū)域的位置127至130的1個核苷酸缺失。
7.一種生產(chǎn)所需病毒的方法，該方法包括以下步驟：
(a)用所需病毒感染權(quán)利要求6的具有增加的病毒生產(chǎn)能力的突變細(xì)胞系；和
(b)培養(yǎng)被所需病毒感染的細(xì)胞系，然后離心培養(yǎng)物的上清液以回收所需病毒。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中用0.005-0.05MOI的所需病毒感染所述細(xì)胞系。
9.一種生產(chǎn)針對病毒疾病的疫苗的方法，該方法包括以下步驟：
(a)用所需病毒感染權(quán)利要求6的具有增加的病毒生產(chǎn)能力的突變細(xì)胞系；
(b)培養(yǎng)被感染所需病毒的細(xì)胞系，然后離心培養(yǎng)物的上清液以回收所需病毒；和
(c)衰減或滅活所回收的病毒。
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