[發明專利]NK細胞強化型血液制劑的制造方法

有效

• 申請號: 201380075111.2
• 申請日: 2013-03-27
• 公開（公告）號: CN105101978B
• 公開（公告）日: 2019-11-01
• 發明（設計）人: 照沼裕;鄧學文;贄田美江
• 申請（專利權）人: 株式會社日本生物治療研究所
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783;A61K35/14;A61P35/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 曾禎;段承恩

提供能夠侵襲性低、簡便且迅速地使從生物體采取的血液中的NK細胞等增殖的NK細胞強化型血液制劑的生產方法。通過用包含抗CD16抗體、OK432、抗CD137抗體、和細胞因子的NK細胞增殖刺激因子刺激血液中的NK細胞，然后在生理細胞溫度下培養該血液來生產NK細胞強化型血液制劑。

技術領域

本發明涉及使NK細胞活化和增殖了的血液制劑的制造方法、和該血液制劑以及NK細胞活性用組合物。

背景技術

1981年以后，作為惡性新生物的癌成為日本人中死因的第1位，約占全部死亡原因的3成。隨著醫學的進步，癌的治愈率、生存率得到明顯改善，但目前仍然還是難治性疾病。癌的治療的標準方法為外科療法、化學療法和放射線療法，近年來，免疫療法作為新的治療法備受矚目，到目前為止已經開發了各種方法(非專利文獻1)。所謂免疫療法，是指利用體內的免疫力來進行癌、病毒感染癥等的治療的方法。可舉出例如，細胞因子療法、疫苗療法、BRM(生物應答調節劑:Biological Response Modifier)療法、細胞免疫療法等。

所謂細胞因子療法，是指通過將具有使T細胞、NK細胞等淋巴細胞增殖或活化的作用的細胞因子直接給予生物體內，從而殺傷癌細胞、病毒感染細胞的治療法。例如，有通過給予白細胞介素2(IL-2)、干擾素的治療法等(非引用文獻2)。然而，該治療法在臨床結果上并未得到預期那樣的效果，還存在產生器官功能不全、體液潴留(給予IL-2的情況下)、感冒癥狀或精神障害(給予干擾素的情況下)等嚴重副作用的問題。

所謂疫苗療法，是指直接或間接地接種對癌細胞特異性抗原或肽，激活針對該抗原的免疫系統的治療法(非專利文獻3)。該治療法雖然報告了一些有效案例，但是存在對不表達HLA I類的腫瘤等沒有效果等問題。

所謂BRM療法，是指利用修飾患者對腫瘤細胞等的生物應答性的物質的治療法(非專利文獻4)。作為BRM，已知PSK、苯丁抑制素、OK432等。該治療方法已經在一部分的癌等中確認了有效性，但本來多是作為通過與外科療法、化學療法這樣的造成免疫力降低的其他治療法并用來取得效果的輔助療法。此外，存在免疫力不一定增強、單獨使用時的抗癌效果等弱的問題。

細胞免疫療法是通過將從患者采取的免疫細胞在體外進行活化、增殖等的處理后再次回輸到該患者的體內，從而提高該患者的免疫力的治療法，也稱為“過繼免疫療法(廣義的過繼免疫療法)”(非專利文獻5)。根據體外處理的免疫細胞的種類，細胞免疫療法分為激活淋巴細胞療法、樹突狀細胞療法。其中，關于樹突狀細胞療法，由于臨床試驗才剛剛開始，所以還未能得到足以判斷有效性的結果。

激活淋巴細胞療法進一步分為在體外對T細胞進行活性·增殖處理的狹義的激活淋巴細胞療法(激活T淋巴細胞療法、或狹義的過繼免疫療法)和對NK細胞進行活性·增殖處理的激活NK細胞療法。

狹義的激活淋巴細胞療法，例如有LAK(淋巴因子激活的殺傷細胞)療法、TIL(腫瘤組織浸潤淋巴細胞)療法、CTL(細胞毒性淋巴細胞)療法等。

LAK療法是培養從患者采取的淋巴細胞，使T細胞、NK細胞活化或增殖后回輸到體內的方法(非專利文獻6)。該方法為了維持給予體內的LAK活性，需要向體內給予大量的IL-2，因此，存在伴有與前述利用IL-2的細胞因子療法同樣的副作用、不能獲得預期那樣的效果的問題。

TIL療法是采取浸潤到腫瘤組織等的淋巴細胞，與LAK療法同樣地體外培養后回輸到體內的方法(非專利文獻7)。然而，該方法存在只能從手術摘出組織采取淋巴細胞、不能獲得預期那樣的效果的問題。

CTL療法是將淋巴細胞與手術采取的癌細胞等一起培養，通過刺激來對該癌細胞等誘導特異性淋巴細胞的方法(非專利文獻8)。也有有效案例的報告，但是存在必須通過手術采取癌細胞，因而侵襲性極高，適應癥例有限，另外在不能采取并培養癌細胞的情況下治療變得困難的問題，只對表達主要組織相容性抗原的癌有效等的問題。