[發明專利]多重核酸檢測方法

有效

• 申請號: 201380072327.3
• 申請日: 2013-12-06
• 公開（公告）號: CN104995309B
• 公開（公告）日: 2020-12-08
• 發明（設計）人: E·奧利瓦瑞斯;J·索倫森;T·蘭德斯
• 申請（專利權）人: 因維蒂公司
• 主分類號: C12Q1/6874
• 分類號: C12Q1/6874;C12M1/36;C12M1/34;C12M1/00
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平

1.一種通過多重連接依賴性探針擴增在單次運行中查詢多個不同靶核酸的體外、非診斷性的且非治療性的方法，其包括：

(a)提供樣品組織以查詢至少100個不同靶核酸，其中所述靶核酸是基因組DNA；

(b)針對所述至少100個不同靶核酸中的每一個提供多個不同的探針組，其中每個探針組包含：

第一基因座特異性探針，其由第一接頭序列和第一靶特異性部分組成；和

第二基因座特異性探針，其由第二接頭序列和鄰近所述第一靶特異性部分的第二靶特異性部分組成；

(c)將所述多個不同探針組與所述至少100個不同靶序列雜交以形成至少100個雜交復合體；

(d)連接所述至少100個雜交復合體以形成至少100個不同的連接的探針；

(e)擴增所述至少100個不同的連接的探針以形成至少100個不同擴增子，其中所述擴增步驟使用第一通用引物和第二通用引物進行，所述第一通用引物包含與所述第一接頭序列互補的區域，所述第二通用引物包含與所述第二接頭序列互補的區域；和

(f)通過對所述至少100個不同擴增子的每一個進行測序在檢測系統中與長度無關地檢測所述至少100個不同擴增子，

其中所述至少100個不同靶核酸在100到1000個靶核酸的范圍內。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述至少100個不同靶核酸在100到500個靶核酸的范圍內。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述檢測系統包括合成測序。

4.根據權利要求3所述的方法，其中所述檢測系統包括配置在包含所述至少100個不同擴增子的陣列上進行合成測序循環的流體處理系統，所述檢測系統被配置為將輻射從源引導至所述陣列并將熒光發射從所述陣列引導至照相機，和配置為自動改變所述檢測系統以增加引導至所述陣列的所述輻射的暴露水平和在所述增加的暴露下檢測從所述陣列到所述照相機的熒光發射的系統控制界面。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其還包括測定所述至少100個不同擴增子的序列。