[發明專利]改進過表達堿性磷酸酶的釀酒酵母重組菌株中乙醇產率并減少生物質積累

有效

• 申請號: 201380071011.2
• 申請日: 2013-12-20
• 公開（公告）號: CN104937098B
• 公開（公告）日: 2023-02-21
• 發明（設計）人: 瑪爾塔·塞姆基夫;康斯坦丁·迪米特拉克;安德烈·A·希博尼;查爾斯·阿巴斯
• 申請（專利權）人: 阿徹丹尼爾斯米德蘭德公司;細胞生物學研究所
• 主分類號: C12N15/00
• 分類號: C12N15/00;C12P7/10;C12P7/06;C12P19/34
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 李平;鄭霞

1.一種釀酒酵母菌株，該菌株包括一個編碼堿性磷酸酶的基因PHO8的核酸序列，該核酸序列可操作地連接至一個啟動子、提供該堿性磷酸酶在細胞中的過表達，使得所述細胞具有較低的細胞內ATP水平存在，較低的生物質積累并以比未修飾的釀酒酵母菌株高的水平表達更高的乙醇產量，其中由該核酸序列表達的該堿性磷酸酶包含一個液泡靶向序列并且該堿性磷酸酶存在于該細胞的液泡中，并且其中該啟動子是一種來自釀酒酵母的乙醇誘導型啟動子。

2.如權利要求1所述的菌株，其中該細胞包含編碼一種堿性磷酸酶的核酸序列的多拷貝，該核酸序列可操作地連接至一個啟動子、在該細胞中表達該堿性磷酸酶。

3.如權利要求1所述的菌株，其中編碼一種堿性磷酸酶、可操作地連接至一個啟動子、在該細胞中表達該堿性磷酸酶的核酸序列被整合到該細胞的基因組中。

4.如權利要求1所述的菌株，其中該誘導型啟動子是一種醇脫氫酶啟動子。

5.如權利要求1所述的菌株，進一步地其特征為在厭氧發酵期間的過程中比一種缺少編碼該堿性磷酸酶、可操作地連接至一個啟動子、表達該堿性磷酸酶的核酸序列的親本菌株產生更高效價的乙醇。

6.如權利要求1所述的菌株，進一步地其特征為在厭氧發酵期間的過程中比一種缺少編碼該堿性磷酸酶、可操作地連接至一個啟動子、表達該堿性磷酸酶的核酸序列的親本菌株具有減少的生物質積累速率。

7.一種生產乙醇的方法，該方法包括在厭氧生長條件下生長根據權利要求1所述的釀酒酵母菌株持續足夠產生乙醇的一段時間。