[發明專利]用于判定急性移植物抗宿主病風險的方法

在審

• 申請號: 201380071004.2
• 申請日: 2013-11-21
• 公開（公告）號: CN105122067A
• 公開（公告）日: 2015-12-02
• 發明（設計）人: O·埃爾米納;M·T·魯比奧;M·布耶;M·萊特德莫賴斯
• 申請（專利權）人: 國家健康科學研究所;國家科學研究中心;法國公立援助醫院;巴黎笛卡爾大學;內克爾患病兒童遺傳疾病的想象研究所
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/50;G01N33/569
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;韓文華

技術領域

本發明涉及用于預測急性移植物抗宿主病風險的方法和相應產品(如試劑盒)，以及用于選擇移植供體和用于調節與這種風險預測相關聯的治療的相應方法。

背景技術

惡性血液病的一線療法一般包括化學療法和/或使用單克隆抗體的化學免疫療法。然而，一些患者經歷復發或疾病進展，有時為標準治療所難以治療。

包括同種異體干細胞移植(SCT)的免疫療法代表對這些難以治愈或者不太可能使用標準化學治療治愈的患者的替代治療方法。造血干細胞移植(HSCT)是這樣一種療法，其涉及從供體或臍帶血取得造血干細胞，并將其靜脈輸注至經調節以接受移植的受體中。然而，因為嚴重的移植后并發癥包括移植物抗宿主病(GVHD)，移植后的總體生存率仍然僅在40％至60％之間。GVHD是由轉移或移植的免疫活性細胞(例如，成熟T細胞)針對宿主組織的免疫反應引起的疾病的總稱，并且在某些情況下能誘發嚴重器官毒性導致死亡。

因此，人類白細胞抗原(HLA)匹配是減少移植物排斥和GVHD風險所必不可少的。然而，非HLA基因也影響到移植結果，甚至在接受來自HLA相同匹配同胞供體(MSD)的移植的患者中GVHD也可能是致命的。此外，MSD僅可用于大約三分之一患者，因此，替代性供體是必要的。更廣泛的使用HLA匹配不相關供體(MUD)而不是臍帶血或不匹配的相關供體，但在接受來自MUD的移植的患者中，也必須考慮GVHD的風險。

因此，仍然需要一種方法用于預測在接受移植的患者中發展為GVHD的風險(或反之，用于判定候選供體是否具有在受體中誘導GVHD的風險的方法)。

最近，兩個回顧性研究，通過分析同種異體HSCT(Rubio等人，Blood2012)或供體移植物(Chaidos等人，2012年)的受體外周血干細胞(PBSC)中效應物和調節性淋巴細胞的頻率分布，證明了恒定型(invariant)NKT(iNKT)細胞在預測急性移植物抗宿主病(aGVHD)中的臨床相關性。在受體中iNKT細胞的損傷重構或在移植物中低CD4-iNKT細胞劑量被證明表示獨立的參數，其能夠顯著預測HSCT后aGVHD的發生。

然而，醫生并不滿足于基于在血液或iNKT細胞的移植物樣本中直接判定發展aGVHD的風險的預測方法，因為難以確定在低和高iNKT細胞之間的閾值，例如導致對中間結果誤判的風險。

發明內容

在第一方面，本發明涉及用于判定候選人類移植供體是否具有在人類移植受體中誘導急性移植物抗宿主病(aGVHD)風險的方法，包括以下步驟：i)對獲自候選人類移植供體的生物樣本的恒定型NKT(iNKT)細胞群體進行擴增；ii)檢測在步驟i)中獲得的群體中CD4-iNKT細胞亞群擴增的存在與否；以及iii)當沒有從iNKT細胞群體中擴增出亞群CD4-iNKT細胞時，推斷出候選人類移植供體具有在人類移植受體中誘導aGVHD的增加的風險。

在第二方面，本發明涉及用于選擇人類移植供體以在人類移植受體中減少誘導aGVHD風險的方法，包括以下步驟(i)進行根據本發明的用于判定風險的方法，以及(ii)根據所述風險判定選擇所述供體。

在第三方面，本發明涉及在人類移植受體進行移植物移植術之后用于調節施用至人類移植受體的免疫抑制治療的方法，包括下列步驟(i)進行根據本發明的用于判定風險的方法，以及(ii)調節免疫抑制治療。

在另一方面，本發明還涉及用于實施根據本發明的上述方法的試劑盒。

具體實施方式

本發明人已經證明，在分析CD4-iNKT細胞亞群的擴增能力(expansioncapacity)之前，將獲自候選供體的PBSC移植物或血液樣本的iNKT細胞群體擴增12或15天的在先步驟，允許安全地判定所述候選供體是否具有在受體中誘導急性GVHD的風險。事實上，在所述擴增之后，只有兩個不同的可能：沒有從iNKT細胞群體中擴增出CD4-iNKT細胞亞群(擴增因子≤1)，因此供體具有在受體中誘導急性GVHD的增加的風險，或者從iNKT細胞群體中顯著地擴增出CD4-iNKT細胞亞群(擴增因子>1)，因此供體幾乎沒有在受體中誘導急性GVHD的風險。

判定急性移植物抗宿主病(aGVHD)風險的方法：