[發明專利]用于判定急性移植物抗宿主病風險的方法

在審

• 申請號: 201380071004.2
• 申請日: 2013-11-21
• 公開（公告）號: CN105122067A
• 公開（公告）日: 2015-12-02
• 發明（設計）人: O·埃爾米納;M·T·魯比奧;M·布耶;M·萊特德莫賴斯
• 申請（專利權）人: 國家健康科學研究所;國家科學研究中心;法國公立援助醫院;巴黎笛卡爾大學;內克爾患病兒童遺傳疾病的想象研究所
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/50;G01N33/569
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;韓文華

1.一種用于判定候選人類移植供體是否具有在人類移植受體中誘導急性移植物抗宿主病（aGVHD）風險的方法，包括以下步驟：i）對獲自候選人類移植供體的生物樣本的恒定型NKT（iNKT）細胞群體進行擴增；ii）在步驟i）中獲得的群體中檢測CD4-iNKT細胞亞群擴增的存在與否；以及iii）當沒有從iNKT細胞群體中擴增出亞群CD4-iNKT細胞時，推斷出候選人類移植供體在人類移植受體中具有誘導aGVHD的增加的風險。

2.一種選擇人類移植供體以在人類移植受體中減少誘導aGVHD風險的方法，包括以下步驟（i）進行根據權利要求1所述的用于判定風險的方法，以及（ii）根據所述風險判定選擇所述供體。

3.一種在人類移植受體進行移植物移植術之后用于調節施用至人類移植受體的免疫抑制治療的方法，包括下列步驟（i）進行根據權利要求1所述的用于判定風險的方法，以及（ii）調節免疫抑制治療。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其中擴增iNKT細胞群體的步驟i）是通過以下進行：（a）從獲自所述候選人類移植供體或獲自所述人類移植受體的生物樣本中分離外周血單核細胞（PBMC）；和（b）在既含有刺激iNKT細胞增殖的試劑又含有活化iNKT細胞的試劑的介質中培養所述PBMC。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其中所述CD4-iNKT細胞亞群是CD3+CD4-TCRVα24Vβ11細胞的群體。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其中所述刺激iNKT細胞增殖的試劑是白介素2（IL-2）。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述活化iNKT細胞的試劑是糖脂抗原，其選自α-半乳糖神經酰胺（α-GalCer）、α-葡萄糖醛酸神經酰胺、磷酸酰肌醇四甘露糖苷、異球三己糖基神經酰胺、神經節苷脂GD3、磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、硫脂、β-半乳糖神經酰胺、脂磷酸聚糖、糖肌醇磷脂、β-異頭半乳糖神經酰胺和α-異頭半乳糖神經酰胺，以及細菌脂質抗原。

8.根據權利要求7所述的方法，其中所述糖脂抗原是α-GalCer。

9.一種用于實施根據權利要求1至8中任一項所述方法的試劑盒，其包括至少a)刺激iNKT細胞增殖的試劑，b）活化iNKT細胞的試劑以及c）特異性結合CD4的標記試劑。

10.根據權利要求9所述的試劑盒，其中所述刺激iNKT增殖的試劑是IL-2，所述活化iNKT細胞的試劑是α-GalCer。

11.根據權利要求9或10所述的試劑盒，其進一步包括d）特異性結合CD3的標記試劑，以及e）特異性結合iNKT細胞的CD1d限制的TCRVα24Vβ11的標記試劑。