[發明專利]親水性重組蛋白的提取方法有效
| 申請號： | 201380068462.0 | 申請日： | 2013-12-18 |
| 公開（公告）號： | CN104884463B | 公開（公告）日： | 2018-09-18 |
| 發明（設計）人： | 大澤利昭;森田啟介 | 申請（專利權）人： | 絲芭博株式會社 |
| 主分類號： | C07K1/14 | 分類號： | C07K1/14;C12P21/02;C07K14/435 |
| 代理公司： | 永新專利商標代理有限公司 72002 | 代理人： | 王靈菇;白麗 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 日本;JP |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 親水性 重組 蛋白 提取 方法 | ||
1.一種親水性重組蛋白的提取方法，其為從表達親水性重組蛋白的宿主提取親水性重組蛋白的方法，其特征在于，其包含：
在所述表達親水性重組蛋白的宿主中添加溶解用溶劑，獲得宿主細胞的溶解物的溶解物獲取工序，和
在通過所述溶解物獲取工序得到的所述宿主細胞的溶解物中添加稀釋用溶劑，然后從得到的稀釋液將不溶物分離，回收含有所述親水性重組蛋白的上清液的工序；
其中，所述親水性重組蛋白的親水性指數為0以下，所述溶解用溶劑為非質子性極性溶劑，所述稀釋用溶劑為水系溶劑。
2.根據權利要求1所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶劑為不具有環狀結構的非質子性極性溶劑。
3.根據權利要求1所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶劑的偶極矩為3.0D以上。
4.根據權利要求1～3中任一項所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶劑為選自二甲基亞砜、N,N-二甲基甲酰胺和N,N-二甲基乙酰胺中的一種以上的非質子性極性溶劑。
5.根據權利要求1～3中任一項所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶劑為在所述非質子性極性溶劑中添加無機鹽而成的溶劑。
6.根據權利要求1～3中任一項所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述稀釋用溶劑為選自(1)水、(2)水與乙醇的混合液和(3)水溶性緩沖液中的一種水系溶劑。
7.根據權利要求1～3中任一項所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶劑相對于所述宿主的質量以體積/質量比計添加0.5倍以上，其中體積的單位為mL、質量的單位為g。
8.根據權利要求1～3中任一項所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述稀釋用溶劑相對于所述宿主細胞的溶解物以體積比計添加0.5倍以上。
9.根據權利要求1～3中任一項所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述親水性蛋白為選自重組蛛絲蛋白、重組節肢彈性蛋白和重組膠原中的一種蛋白。
10.根據權利要求4所述的親水性重組蛋白的提取方法，其中，所述溶解用溶劑為在所述非質子性極性溶劑中添加無機鹽而成的溶劑。
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