[發明專利]胡蘿卜素羥化酶及其用于產生類胡蘿卜素的用途

在審

• 申請號: 201380066965.4
• 申請日: 2013-08-27
• 公開（公告）號: CN105308180A
• 公開（公告）日: 2016-02-03
• 發明（設計）人: C·法雷爾;M·馬約爾加;B·謝弗勒
• 申請（專利權）人: 帝斯曼知識產權資產管理有限公司
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02;C12P23/00
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 史悅

1.一種用于類異戊二烯的微生物羥化的具有羥化酶活性的多肽，其選自下組：

a)SEQIDNO:2的多肽；

b)源自SEQIDNO:2通過氨基酸的取代、插入或缺失并與SEQIDNO:2的序列在氨基酸水平具有至少50％同源性的多肽。

2.權利要求1的多肽，其中所述蛋白具有用于將β-胡蘿卜素轉變成β-隱黃素和/或玉米黃質的酶活性，和/或將角黃素轉變成andirubin和/或蝦青素的酶活性。

3.一種編碼權利要求1的多肽的分離的核酸。

4.權利要求3的分離的核酸，其分別由SEQIDNO:1和SEQIDNO:3描述的序列組成。

5.一種核酸構建體或表達載體，其包含與一個或多個(幾個)調控序列可操作連接的權利要求3或4的多核苷酸，所述調控序列指導所述多肽在表達宿主細胞中的產生。

6.一種轉化的微生物(宿主細胞)，其中表達權利要求3或4的核酸。

7.權利要求6的轉化的微生物，其類胡蘿卜素代謝不同于野生型。

8.權利要求7的轉化的微生物，其中所述微生物是含油株(oleaginousstrain)。

9.權利要求8的轉化的微生物，其中所述含油株是解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)的菌株。

10.一種用于產生權利要求6的轉化的微生物的方法，其包括引入由SEQIDNO:1中描述的序列組成的核酸或核酸構建體，其與一個或多個調節信號功能性連接。

11.一種用于制備類胡蘿卜素或類胡蘿卜素衍生物的方法，其包括在權利要求1的多肽存在下將β-紫羅蘭酮轉變成3-羥基-β-紫羅蘭酮和/或將4-酮-β-紫羅蘭酮轉變成3-羥基-4-酮-β-紫羅蘭酮結構元件。

12.權利要求11的方法，包括如下步驟：

a)在有助于類胡蘿卜素產生的條件下培養根據權利要求6至9中任一項的轉化的微生物；和

b)回收所述類胡蘿卜素和類胡蘿卜素衍生物。

13.一種包含權利要求1或2任一項的多肽的組合物。