[發(fā)明專利]用于高效率且高通量產(chǎn)生轉基因事件的改進的大豆轉化

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201380066609.2
• 申請日: 2013-12-18
• 公開（公告）號: CN104869809A
• 公開（公告）日: 2015-08-26
• 發(fā)明（設計）人: D·帕雷迪;S·R·契納雷迪;T·明尼克斯;O·卡爾波娃;D·格里芬;J·P·塞繆爾;K·A·史密斯;R·薩莉亞-米蘭;T·K·瑪爾
• 申請（專利權）人: 美國陶氏益農(nóng)公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01H1/06;C12N15/82;C12N5/04
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 羅天樂

1.一種轉化大豆的方法，其中該方法包括：

縱向分割大豆種子以獲得分割的大豆種子；

保留部分胚軸附著于該分割的大豆種子；

用至少一種轉基因轉化該包含部分胚軸的分割的大豆種子；和

選擇經(jīng)轉化的包含部分胚軸的分割的大豆種子。

2.權利要求1的方法，其中該方法包括在縱向分割大豆種子之前使大豆種子吸脹。

3.權利要求1的方法，其中大豆種子沿著該大豆種子的種臍被縱向分割。

4.權利要求1的方法，其中所述部分胚軸包括附著于分割的大豆種子的節(jié)端的1/3-1/2的胚軸。

5.權利要求1的方法，其中該方法包括在選擇培養(yǎng)基上從經(jīng)轉化的包含部分胚軸的分割的大豆種子再生一個或多個外植體。

6.權利要求5的方法，其中該方法包括從所述一個或多個外植體誘導形成一個或多個芽。

7.權利要求6的方法，其中該方法包括將所述一個或多個芽培養(yǎng)成完整、能育的大豆植物。

8.通過權利要求7的方法產(chǎn)生的完整、能育的大豆植物。

9.權利要求7的方法，其中該方法包括將該完整、能育、成熟的大豆植物與另一大豆植物雜交產(chǎn)生大豆后代植物。

10.通過權利要求9的方法產(chǎn)生的大豆后代植物。

11.權利要求6的一個或多個芽，其包含經(jīng)轉化的胚系細胞。

12.通過權利要求5的方法產(chǎn)生的再生外植體。

13.權利要求1的方法，其中該方法包括使用轉化方法轉化該包含部分胚軸的分割的大豆種子。

14.權利要求13的轉化方法，其選自下組：根癌土壤桿菌介導的轉化方法、高速微噴射介導的轉化方法、顯微注射介導的轉化方法、電穿孔介導的轉化方法、或直接DNA攝取介導的轉化方法。

15.權利要求1的方法，其中該方法包括使用選擇劑選擇經(jīng)轉化的包含部分胚軸的分割的大豆種子。

16.權利要求15的選擇劑，其選自下組：草銨膦、膦絲菌素、2,4-D、卡那霉素、潮霉素、和草甘膦。

17.權利要求1的方法，其中該方法包括包含啟動子、開放閱讀框和3′非翻譯區(qū)的轉基因。

18.權利要求17的開放閱讀框，其包含標志物基因。

19.權利要求18的標記基因，其包括黃色熒光蛋白標志物基因。

20.權利要求18的標記基因，其包括pat標志物基因。

21.權利要求17的開放閱讀框，其包括農(nóng)藝基因。

22.權利要求21的農(nóng)藝基因，其選自下組：植物疾病抗性基因、除草劑抗性基因和增值基因。