[發(fā)明專利]使用細(xì)胞內(nèi)生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移識(shí)別生物活性劑的細(xì)胞靶標(biāo)結(jié)合有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201380064252.4 | 申請(qǐng)日： | 2013-12-12 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN104871001B | 公開（公告）日： | 2018-09-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | C·W·希特科;T·柯克蘭;T·馬赫萊特;R·F·奧哈納;M·羅貝斯;K·伍德 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 普洛麥格公司 |
| 主分類號(hào)： | G01N33/52 | 分類號(hào)： | G01N33/52;C07D491/22;C07D491/147;C12N15/62;C12N5/10;C12N9/02;C12Q1/66;C40B40/04;C40B40/10 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494 | 代理人： | 岑曉東 |
| 地址： | 美國威*** | 國省代碼： | 美國;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 使用 細(xì)胞內(nèi) 生物 發(fā)光 共振 能量 轉(zhuǎn)移 識(shí)別 活性劑 細(xì)胞 靶標(biāo) 結(jié)合 | ||
1.一種測(cè)定系統(tǒng)，其包含：
(a)拴系至小分子熒光團(tuán)的小分子生物活性劑；
(b)表達(dá)細(xì)胞靶標(biāo)和生物發(fā)光報(bào)道子的蛋白質(zhì)融合體的細(xì)胞，其中一旦相互作用，所述生物活性劑能夠非共價(jià)結(jié)合所述細(xì)胞靶標(biāo)，其中所述生物發(fā)光報(bào)道子的發(fā)射光譜與所述熒光團(tuán)的吸收光譜重疊以便自所述生物發(fā)光報(bào)道子至所述熒光團(tuán)的生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移；以及
(c)所述生物發(fā)光報(bào)道子的底物。
2.如權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中所述熒光團(tuán)是羧基若丹明類似物。
3.如權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中所述生物發(fā)光報(bào)道子包含序列如SEQ ID NO.:1所示的多肽。
4.如權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中(a)是在細(xì)胞外添加。
5.如權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中所述細(xì)胞靶標(biāo)是所述生物活性劑的結(jié)合配偶體。
6.如權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中所述生物活性劑一旦與所述細(xì)胞靶標(biāo)結(jié)合，所述底物通過所述生物發(fā)光報(bào)道子向反應(yīng)產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化便造成所述熒光團(tuán)被BRET激發(fā)和來自所述熒光團(tuán)的熒光發(fā)射。
7.一種用于檢測(cè)生物活性劑與細(xì)胞靶標(biāo)之間的相互作用的方法，其包括：
(a)提供權(quán)利要求1的系統(tǒng)；
(b)將所述細(xì)胞與拴系至熒光團(tuán)的所述生物活性劑接觸；
(c)使所述細(xì)胞與所述生物發(fā)光報(bào)道子的底物接觸；
(d)檢測(cè)自所述熒光團(tuán)發(fā)出的能量，其中自所述熒光團(tuán)發(fā)出的能量指示所述生物活性劑與所述細(xì)胞靶標(biāo)相互作用。
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