[發(fā)明專利]卵泡發(fā)育和卵細(xì)胞成熟的刺激

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201380059070.8
• 申請(qǐng)日: 2013-09-13
• 公開（公告）號(hào): CN105025912B
• 公開（公告）日: 2018-08-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 亞倫·J·W·薛;圓·程;出口雅史;川村一宏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 小利蘭·斯坦福大學(xué)托管委員會(huì);圣瑪麗安娜醫(yī)科大學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)管理中心
• 主分類號(hào): A61K38/00
• 分類號(hào): A61K38/00;A61K38/24
• 代理公司: 北京弘權(quán)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11363
• 代理人: 榮文英;郭放

本發(fā)明提供通過破壞Hippo信號(hào)傳導(dǎo)途徑來刺激哺乳動(dòng)物的卵泡的方法。

聯(lián)邦政府資助的研究和開發(fā)

本發(fā)明是在政府支持下根據(jù)美國國立衛(wèi)生研究院授予的許可HD068158進(jìn)行。政府享有本發(fā)明中的某些權(quán)利。

背景技術(shù)

哺乳動(dòng)物生殖細(xì)胞的生長(zhǎng)和成熟被包括由垂體前葉分泌的促性腺激素和局部旁分泌因子的激素復(fù)雜地控制。在成人卵巢內(nèi)的大多數(shù)卵細(xì)胞(或卵母細(xì)胞)維持處于第一減數(shù)分裂前期的延長(zhǎng)階段，由周圍卵泡體細(xì)胞被膜。周期性地，一組原始卵泡進(jìn)入卵泡生長(zhǎng)階段。在此期間，卵細(xì)胞經(jīng)歷大體積增加，且卵泡顆粒細(xì)胞的數(shù)目增加。成熟卵細(xì)胞合成允許卵泡細(xì)胞增殖的旁分泌因子，且卵泡細(xì)胞分泌增強(qiáng)血管形成并允許卵細(xì)胞生長(zhǎng)的生長(zhǎng)和分化因子。在進(jìn)行到某一階段之后，卵細(xì)胞和它們的卵泡死亡，除非將它們暴露于防止體細(xì)胞凋亡的促性腺激素。

哺乳動(dòng)物卵巢由作為基礎(chǔ)功能單元的卵泡組成。卵泡的總數(shù)在年輕時(shí)確定，且該池的消耗導(dǎo)致生殖衰老(reproductive senescence)。每個(gè)卵泡發(fā)育，從而排卵或經(jīng)歷變性。單獨(dú)的卵泡由最里面的卵細(xì)胞、周圍的顆粒細(xì)胞和外層的卵泡膜細(xì)胞組成。每個(gè)卵泡的命運(yùn)由內(nèi)分泌因子以及旁分泌因子控制。在獲取竇腔之前，卵泡發(fā)育經(jīng)過原始階段、初級(jí)階段和次級(jí)階段。在竇階段，少數(shù)卵泡在青春期之后出現(xiàn)的周期促性腺激素刺激下達(dá)到排卵前階段，并成為生殖年齡婦女的卵巢雌激素的周期分泌的主要來源。響應(yīng)在每個(gè)生殖周期期間的排卵前促性腺激素激增，優(yōu)勢(shì)格拉夫卵泡(Graafian follicle)排卵以釋放成熟的卵細(xì)胞以便受精，而剩下的卵泡膜和顆粒細(xì)胞經(jīng)歷轉(zhuǎn)化以變成黃體。

一旦進(jìn)入生長(zhǎng)池，卵泡則在最低程度的損失下繼續(xù)發(fā)展到初級(jí)階段、次級(jí)階段和早期竇階段。盡管FSH治療主要通過抑制早期竇卵泡的細(xì)胞凋亡而廣泛用以在不孕患者中產(chǎn)生排卵前卵泡，但一些患者是對(duì)FSH治療的低應(yīng)答者，因?yàn)樗齻兊穆殉埠泻苌俚脑缙诟]卵泡，如通過在月經(jīng)周期的第三天她們升高的血清FSH和較低AMH水平所反映。

在整個(gè)生殖期中，原始卵泡經(jīng)歷初始募集以進(jìn)入初級(jí)卵泡的生長(zhǎng)池。在人類卵巢中，據(jù)估計(jì)初級(jí)卵泡達(dá)到次級(jí)卵泡階段需要大于120天，而據(jù)估計(jì)從次級(jí)卵泡階段生長(zhǎng)到早期竇階段需要71天。一旦開始進(jìn)入生長(zhǎng)池，卵泡就會(huì)發(fā)展達(dá)到竇階段，并且直至早期竇階段，都見到最低程度的卵泡損失。在周期募集期間，循環(huán)FSH的增加允許一群竇卵泡逃脫細(xì)胞凋亡性死亡。在該群體之中，主導(dǎo)卵泡通過分泌高水平的雌激素和抑制素以抑制垂體FSH釋放而占優(yōu)勢(shì)地形成。結(jié)果是負(fù)向選擇剩余的群體，導(dǎo)致其最后死亡。附隨地，局部生長(zhǎng)因子和脈管系統(tǒng)的增加允許正向選擇優(yōu)勢(shì)卵泡，因此確保其最終生長(zhǎng)和最后排卵及黃體形成。在周期募集之后，竇卵泡僅用2周就變成優(yōu)勢(shì)格拉夫卵泡。人類卵泡從原始階段到排卵前階段的總體發(fā)育需要超過6個(gè)月。

卵泡從最小的原始和初級(jí)卵泡發(fā)育到最大的排卵前卵泡需要不同的階段依賴性刺激和存活因子。卵泡從初級(jí)階段有效成熟到次級(jí)階段、竇階段和排卵前階段的方法具有重大意義，包括用于體外和體內(nèi)卵泡成熟的方法。本發(fā)明解決了該問題。

發(fā)明內(nèi)容

提供通過以下促進(jìn)哺乳動(dòng)物卵泡生長(zhǎng)到排卵前階段的組合物和方法：使哺乳動(dòng)物卵泡與有效劑量的破壞Hippo途徑中信號(hào)傳導(dǎo)的試劑或在被破壞的Hippo信號(hào)傳導(dǎo)的下游起作用的試劑中的至少一種接觸足以使所述卵泡生長(zhǎng)到排卵前階段的時(shí)間。所述接觸可在不存在卵巢的實(shí)體破壞，即卵巢完整的情況下進(jìn)行。在一些實(shí)施方案中，所述卵泡在離體培養(yǎng)物中接觸所述試劑。在其它實(shí)施方案中，所述卵泡在體內(nèi)與所述試劑接觸。在所述接觸在體內(nèi)進(jìn)行的情況下，所述試劑可局部地施用至所述卵巢，例如施用至遭受卵巢功能早衰的婦女、遭受多囊性卵巢綜合征的婦女、中年不孕婦女等。所述有效劑量為允許卵泡經(jīng)歷充分生長(zhǎng)以達(dá)到排卵前階段的劑量。