[發明專利]促進傷口愈合的方法

在審

• 申請號: 201380049696.0
• 申請日: 2013-07-29
• 公開（公告）號: CN104684563A
• 公開（公告）日: 2015-06-03
• 發明（設計）人: 普拉哈·薩姆帕斯
• 申請（專利權）人: 科技研究局(A*STAR)
• 主分類號: A61K31/7088
• 分類號: A61K31/7088;A61K38/17;A61P17/02
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

相關申請的交叉引用

本申請要求2012年7月27日提交的SG專利申請201205614-9號的優先權權益，將其內容以其整體引入于此以作參考用于所有目的。

發明領域

本發明通常涉及生物化學領域。具體而言，本發明涉及可用于傷口治療的mi-RNA、抗-miRNA和多肽。

發明背景

糖尿病為一組特征在于由受試者產生和/或使用胰島素的能力受損引起的血液中高葡萄糖水平的疾病。當糖尿病沒有得到良好控制時，糖尿病可穩步惡化并引起并發癥如失明、神經損傷、腎衰竭、心臟病和截肢。許多這些并發癥是由脈管系統損傷和不能愈合傷口造成的。由糖尿病患者不能愈合傷口引起的慢性傷口是主要的全球性健康負擔，且為最常見的下肢截肢的原因。在極端情況下，無效的傷口愈合可導致死亡。

傷口愈合需要復雜的生物學事件的協調整合，這些生物學事件包括細胞遷移、增殖和伴隨基質沉積的細胞外重塑，普遍受到TGF-β和其它生長因子刺激。在糖尿病中，這些復雜且交互的防護過程被破壞。因此，需要提供能夠恢復或改善正常傷口愈合的方法或組合物。

發明概述

在一個方面，提供有一種促進傷口愈合或傷口閉合的方法。本文所述的方法包括施用miR-198抑制劑和/或卵泡抑素樣-1(follistatin-like-1,FSTL1)多肽。

在另一方面，提供有一種治療慢性皮膚傷口的方法。治療慢性皮膚傷口的方法可包括施用miR-198抑制劑和/或卵泡抑素樣-1(FSTL1)多肽。

在另一方面，提供有一種不愈合傷口(慢性皮膚傷口)的鑒定方法。所述慢性皮膚傷口的鑒定方法可包括分析miR-198的表達水平，其中miR-198的表達或表達增加表明所述傷口為慢性皮膚傷口。如本文所述的不愈合傷口的鑒定方法可任選包括分析FSTL1基因的表達和/或FSTL1多肽水平，其中FSTL1基因的表達減少或無表達和/或FSTL1多肽的水平降低或缺失表明所述傷口為慢性皮膚傷口。

在另一方面，提供有miR-198作為用于鑒定不愈合傷口(慢性皮膚傷口)的生物標記物的用途。

在另一方面，提供有miR-198在制備用于治療不愈合傷口的藥物中的用途。還提供FSTL1多肽在制備用于治療不愈合傷口的藥物中的用途。

在另一方面，提供有一種包含如本文所述的組合物或化合物的藥物組合物。所述藥物組合物可包含miR-198抑制劑和TGF-β1；或miR-198抑制劑和FSTL1多肽；或FSTL多肽和TGF-β1；或miR-198抑制劑和TGF-β1以及FSTL1多肽。

附圖簡述

參見詳細說明，并結合非限制性實例和附圖考慮時，將更好地理解本發明，在附圖中：

圖1示出在上下文特定生理狀態下外顯子miRNA或所連接的ORF的表達。a)染色體3(NCBI參考序列：NM_007085)中FSTL1基因的示意圖，示出外顯子-內含子邊界，編碼miR-198前體的3’-UTR序列(下劃線的核苷酸表示成熟miR-198)。b)示出miR-198表達的柱狀圖，如通過qRT-PCR在器官培養外植體中在損傷后的指定時間點所測定的。如早在損傷后3小時觀察到的miR-198的顯著下調**[P<0.001]。c)在損傷后的(左)0和(右)24小時時，由對正常皮膚上的成熟miR-198具有特異性的LNA探針原位雜交獲得的圖像。注意，受傷后24小時時，miR-198表達顯著下調。d)在損傷前后在指定的時間點，對外植體樣品中FSTL1mRNA的典型半定量-RT-PCR分析。e)在受傷后的(左)0和(右)24小時時FSTL1蛋白的免疫組織化學定位。FSTL1蛋白表達在受傷后24小時時觀察到(n＝5)。比例尺＝100μM。圖1闡明了在損傷后0和24小時時，人皮膚離體器官培養系統的差異miRNA表達譜。圖1闡明了miR-198為在損傷時下調的一致且顯著差異表達的miRNA。