[發明專利]用于改變活細胞中存在的目標RNA分子的序列的寡核苷酸

有效

• 申請號: 201380047636.5
• 申請日: 2013-07-12
• 公開（公告）號: CN104640986B
• 公開（公告）日: 2018-08-28
• 發明（設計）人: D·A·德布爾;T·里策馬
• 申請（專利權）人: ProQR治療上市公司II
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;A61K48/00;A61K31/7088
• 代理公司: 北京尚誠知識產權代理有限公司 11322
• 代理人: 龍淳

1.一種用于治療人體或動物體中的囊性纖維化的單鏈寡核苷酸，其中所述寡核苷酸的所有核苷均為2’-O烷基核糖核苷，其中通過在使得活細胞能攝取所述寡核苷酸的條件下對所述活細胞提供所述寡核苷酸，所述寡核苷酸能夠改變所述人體或動物體的活細胞中存在的目標RNA分子的序列，其中所述寡核苷酸包括與所述目標RNA分子至少部分互補的序列，使得在所述活細胞中發生寡核苷酸與目標RNA或其前體或其模板的雜交，使所述活細胞中存在的生化機制將寡核苷酸序列中相對于目標RNA分子的差異直接地或經由其前體或其模板拷貝到RNA分子上，以引起所述目標RNA的變化，其中：

所述寡核苷酸由SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:3的核苷酸1-33組成，并且其中所述目標RNA是CFTR RNA。

2.根據權利要求1所述的寡核苷酸，其中(a)：所述目標RNA的序列變化導致細胞改變其表型；(b)其中所述目標RNA的序列的變化通過測定所述目標RNA或其前體或其模板的序列而證實；(c)其中所述目標RNA的序列的變化通過測定由所述目標RNA編碼的多肽產物的序列而證實；(d)其中所述目標RNA的序列的變化通過測定所述活細胞或包括所述細胞的有機體中的表型變化而證實，理想地，其中所述表型變化是與變化之前目標RNA的序列有因果關系的疾病的減輕。

3.根據權利要求1-2中任一項所述的寡核苷酸，其中所述寡核糖核苷酸包括肌苷，并且/或者包括修飾。

4.根據權利要求3所述的寡核苷酸，其中所述修飾的核苷酸選自5-甲基-dC、2-氨基-dA、C5-嘧啶，和/或選自硫代磷酸酯鍵和甲基膦酸酯鍵的修飾的核苷間的鍵。

5.根據權利要求1-2中任一項所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸的全部核苷均為2’-O-甲基核糖核苷。

6.根據權利要求1-2中任一項所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸在載體中提供，并且/或者其中所述寡核苷酸與遞送化合物復合，并且/或者與甾醇連接。

7.根據權利要求6所述的寡核苷酸，其中所述載體為脂質體、多核糖體或納米顆粒。

8.根據權利要求6所述的寡核苷酸，其中所述遞送化合物為聚乙烯-亞胺(PEI)或聚乙二醇(PEG)。

9.根據權利要求6所述的寡核苷酸，其中所述甾醇為膽固醇。

10.根據權利要求1-2中任一項所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸以干燥制劑或以氣溶膠的形式提供給呼吸道或肺。

11.根據權利要求10所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸經由氣道提供給呼吸道或肺。

12.根據權利要求10所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸以干燥制劑或以氣溶膠的形式使用噴霧器提供給呼吸道或肺。

13.根據權利要求10所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸與轉染介質和/或囊性纖維化藥物和/或用于治療CF的小分子一起提供。

14.根據權利要求13所述的寡核苷酸，其中所述囊性纖維化藥物為DNA酶或甘露醇。

15.根據權利要求14所述的寡核苷酸，其中所述甘露醇是Bronchitol。

16.根據權利要求13所述的寡核苷酸，其中所述用于治療CF的小分子是Kalydeco(ivacaftor；VX-770)、VX-809(Lumacaftor)和/或VX-661。

17.根據權利要求10所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸在高滲鹽水組合物中提供。