[發明專利]外膜囊泡

有效

• 申請號: 201380045396.5
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN104602702B
• 公開（公告）日: 2021-08-27
• 發明（設計）人: G·格蘭迪;I·馬格里特伊若斯;E·恰洛特
• 申請（專利權）人: 葛蘭素史密絲克萊恩生物有限公司
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 彭昶

1.一種來自革蘭氏陰性細菌的外膜囊泡(OMV)，其特征在于，所述OMV包含至少一種在其腔中游離的異源蛋白，并且當給予哺乳動物時，所述OMV能夠引發針對所述異源蛋白的免疫應答，所述異源蛋白在所述OMV的腔中有功能活性，所述異源蛋白是可溶性蛋白，所述異源蛋白是(a)異源生物體中的周質蛋白且天然信號序列被周質蛋白的信號序列取代，或是(b)異源生物體中的膜相關蛋白質并且刪除了膜錨定物，其中所述革蘭氏陰性細菌是大腸桿菌，并且其中所述異源蛋白是來自釀膿鏈球菌的胞外膽固醇依賴性鏈球菌溶血素O的雙突變體(Slo-dm)或者來自釀膿鏈球菌的細胞被膜絲氨酸蛋白酶SpyCep。

2.如權利要求1所述的OMV，其特征在于，所述免疫應答是抗體免疫應答。

3.一種制備權利要求1所述的OMV的方法，所述方法包括在所述革蘭氏陰性細菌的周質中表達所述異源蛋白的步驟。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，使用表達載體使所述異源蛋白在革蘭氏陰性細菌的周質中表達，所述表達載體包含與周質蛋白的信號序列的編碼核酸可操作連接的所述異源蛋白的編碼核酸序列。

5.如權利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述方法還包括分離所述OMV的步驟。

6.通過權利要求3-5中任一項所述的方法得到的OMV。

7.如權利要求1、2和6中任一項所述的OMV，其特征在于，所述革蘭氏陰性細菌是所述革蘭氏陰性細菌的高發泡菌株。

8.如權利要求7所述的OMV，其特征在于，所述革蘭氏陰性細菌是ΔtolR大腸桿菌菌株或ΔompA大腸桿菌菌株。

9.如權利要求1、2和6中任一項所述的OMV，其特征在于，所述異源蛋白是抗原。

10.如權利要求1、2和6中任一項所述的OMV，其特征在于，所述OMV包含至少兩種在其腔中游離的異源蛋白。

11.如權利要求10所述的OMV，其特征在于，所述OMV包含至少三種在其腔中游離的異源蛋白。

12.如權利要求10所述的OMV，其特征在于，所述異源蛋白包含來自釀膿鏈球菌的胞外膽固醇依賴性鏈球菌溶血素O的雙突變體(Slo-dm)和來自釀膿鏈球菌的假定表面排斥蛋白Spy0269。

13.如權利要求11所述的OMV，其特征在于，所述異源蛋白包括來自釀膿鏈球菌的胞外膽固醇依賴性鏈球菌溶血素O的雙突變體(Slo-dm)、來自釀膿鏈球菌的細胞被膜絲氨酸蛋白酶SpyCEP和來自釀膿鏈球菌的假定表面排斥蛋白Spy0269。

14.一種藥物組合物，所述藥物組合物包含(a)如權利要求1、2或6-13中任一項所述的OMV和(b)藥學上可接受的運載體。

15.如權利要求14所述的藥物組合物，其特征在于，所述組合物是免疫原性組合物。

16.如權利要求14或15所述的藥物組合物，其特征在于，所述組合物是疫苗。

17.來自革蘭氏陰性細菌的OMV用于制備在哺乳動物中產生針對異源蛋白的免疫應答的產品的用途，其中所述OMV在其腔中包含至少一種異源蛋白，并且所述免疫應答針對所述OMV中的所述異源蛋白，其中所述革蘭氏陰性細菌是大腸桿菌，并且其中所述異源蛋白是來自釀膿鏈球菌的胞外膽固醇依賴性鏈球菌溶血素O的雙突變體(Slo-dm)或者來自釀膿鏈球菌的細胞被膜絲氨酸蛋白酶SpyCep。