[發明專利]制備患者特異性膠質母細胞瘤動物模型的方法及其用途有效
| 申請號： | 201380044503.2 | 申請日： | 2013-06-21 |
| 公開（公告）號： | CN104582477B | 公開（公告）日： | 2018-09-21 |
| 發明（設計）人： | 南都鉉;秦州酀;朱景敏 | 申請（專利權）人： | 社會福祉法人三星生命公益財團 |
| 主分類號： | A01K67/027 | 分類號： | A01K67/027;G01N33/15;C12N15/09 |
| 代理公司： | 北京坤瑞律師事務所 11494 | 代理人： | 陳桉 |
| 地址： | 韓國*** | 國省代碼： | 韓國;KR |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 制備 患者 特異性 膠質 細胞 動物 模型 方法 及其 用途 | ||
1.一種生產膠質母細胞瘤小鼠模型的方法，包括步驟：
(a)將分離自患者的膠質母細胞瘤組織分開成為4個或更多部分，從整個膠質母細胞瘤組織的4個或更多部分的每個部分收集1個或更多碎塊；
(b)均勻混合所收集的碎塊以勻質化來自所述整個膠質母細胞瘤組織的4個或更多部分的每個部分的膠質母細胞瘤組織碎塊；
(c)通過對混合物順序地執行機械解離和使用包括蛋白酶和DNase的酶混合物的酶解離從由4個或更多部分收集的碎塊解離膠質母細胞瘤單細胞；和
(d)通過Percoll梯度離心從移植物樣品去除血細胞，所述移植物樣品包含在步驟(c)中獲得的單細胞形式的膠質母細胞瘤細胞；和
(e)通過將所述樣品注射到腦位于前囪左側1.5-2.5mm和前囪前0.5-1.5mm和從硬腦膜起深1.8-2.2mm的位置，將所述移植物樣品原位異種移植到免疫缺陷小鼠的腦中，
其中在步驟(e)中原位異種移植到免疫缺陷小鼠的腦中的移植物樣品含有1x105-5x105個膠質母細胞瘤細胞且體積為5-15μl。
2.如權利要求1的方法，其中所述1個或更多碎塊各具有1-8mm3體積，是從在步驟(a)中獲得的膠質母細胞瘤組織的4個或更多部分收集的。
3.如權利要求1的方法，其中在步驟(c)中的收集的多個碎塊的混合物的體積為分離自患者的膠質母細胞瘤組織的體積的30-100％。
4.如權利要求1的方法，其中免疫缺陷小鼠是NOG小鼠。
5.如權利要求1的方法，其中膠質母細胞瘤小鼠模型顯示出與患者的膠質母細胞瘤相同的遺傳和形態學性狀。
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