[發明專利]用于在細胞中表達基因的啟動子無效

申請號：	201380032068.1	申請日：	2013-06-17
公開（公告）號：	CN104508114A	公開（公告）日：	2015-04-08
發明（設計）人：	埃里克·皮特·洛斯;威爾伯特·赫爾曼·馬里·海涅;赫爾曼·揚·佩爾;羅波圖斯·安東尼厄斯·戴維爾德;布倫達·沃恩克	申請（專利權）人：	帝斯曼知識產權資產管理有限公司
主分類號：	C12N1/15	分類號：	C12N1/15;C12N9/18;C12N9/26;C12N9/42;C12N15/80;C12P1/02;C12P21/02
代理公司：	北京東方億思知識產權代理有限責任公司11258	代理人：	肖善強
地址：	荷蘭***	國省代碼：	荷蘭;NL
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摘要：
搜索關鍵詞：	用于細胞表達基因啟動子
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【權利要求書】：

1.Rasamsonia啟動子DNA序列，優選Rasamsonia?emersonii啟動子DNA序列。

2.根據權利要求1所述的Rasamsonia啟動子DNA序列，其連接至能夠被過表達的編碼序列。

3.根據權利要求1所述的Rasamsonia啟動子DNA序列，其對應于強啟動子和/或誘導型啟動子。

4.啟動子DNA序列，例如：

(a)以下列表中所示的DNA序列：SEQ?ID?NO:1、SEQ?ID?NO:2、SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:4、SEQ?ID?NO:5、SEQ?ID?NO:12、SEQ?ID?NO:13、SEQ?ID?NO:14、SEQ?ID?NO:15、SEQ?ID?NO:16或者SEQ?ID?NO:17；

(b)能夠與(a)中DNA序列的互補體雜交的DNA序列；或者

(c)與(a)中DNA序列至少50％同源的DNA序列。

5.DNA構建體，其包含根據權利要求1或2所述的啟動子DNA序列和與所述啟動子DNA序列可操作相連的編碼序列，從而所述編碼序列能夠在所述啟動子DNA序列的控制下被表達。

6.宿主細胞，優選真菌宿主細胞，其包含根據權利要求3所述的DNA構建體。

7.根據權利要求4所述的宿主細胞，其中所述宿主細胞是來自以下屬的細胞：Acremonium、Agaricus、Aspergillus、Aureobasidium、Chrysosporium、Coprinus、Cryptococcus、Filobasidium、Fusarium、Geosmithia、Humicola、Magnaporthe、Mucor、Myceliophthora、Neocallimastix、Neurospora、Paecilomyces、Penicillium、Piromyces、Panerochaete、Pleurotus、Rasamsonia、Schizophyllum、Talaromyces、Thermoascus、Thermomyces、Thielavia、Tolypocladium或者Trichoderma，優選來自Rasamsonia、Aspergillus、Penicillium、Chrysosporium或者Trichoderma屬，優選為Rasamsonia?emersonii。

8.一種在合適的宿主細胞中表達編碼序列的方法，其包括：

(a)提供根據權利要求3所述的DNA構建體；

(b)使用所述DNA構建體轉化合適的宿主細胞；以及

(c)在有助于所述編碼序列表達的培養條件下培養所述合適的宿主細胞。

9.一種在合適的宿主細胞中生產生物化合物的方法，其包括：

(a)提供權利要求3所定義的DNA構建體；

(b)使用所述DNA構建體轉化合適的宿主細胞；以及

(c)在有助于所述編碼序列表達的培養條件下培養所述合適的宿主細胞；以及任選地，

(d)從培養液回收所述生物化合物。

10.根據權利要求7所述的方法，其中生產的所述生物化合物為多肽或者代謝產物。

11.根據權利要求8所述的方法，其中生產的所述多肽由存在于權利要求2所定義的DNA構建體中的編碼序列來編碼。

12.根據權利要求10所述的方法，其中存在于權利要求2所定義的DNA構建體中的所述編碼序列編碼酶，所述酶任選地參與代謝產物的生產。