[發(fā)明專利]含磷脂組合物的制造方法及含磷脂組合物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380031182.2
• 申請日: 2013-06-07
• 公開（公告）號: CN104379757B
• 公開（公告）日: 2017-03-15
• 發(fā)明（設計）人: 重枝麻由美;田中立志;井上良計
• 申請（專利權）人: 株式會社鐘化
• 主分類號: C12P9/00
• 分類號: C12P9/00;C12P7/64
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司11021
• 代理人: 蔣亭

技術領域

本發(fā)明涉及包含磷脂酰絲氨酸的含磷脂組合物的制造方法及含磷脂組合物。

背景技術

磷脂酰絲氨酸被認為對認知功能障礙、記憶力、集中力的改善等腦功能的提高是有效的，已知通過鍵合DHA(二十二碳六烯酸)其效果進一步提高。DHA鍵合磷脂酰絲氨酸可以通過從牛腦中萃取來生產(chǎn)，但出于瘋牛病的影響近年來沒有進行。另外，已知DHA鍵合磷脂酰絲氨酸可以通過在絲氨酸的存在下使磷脂酶D作用于DHA鍵合磷脂酰膽堿、DHA鍵合磷脂酰乙醇胺等來合成(專利文獻1)。另外，關于作為DHA鍵合磷脂酰絲氨酸的原料的DHA鍵合磷脂酰膽堿，有從包含大量多元不飽和脂肪酸的、金槍魚、鰹魚、鮐魚、沙丁魚、秋刀魚、竹莢魚等魚類的組織；由用包含多元不飽和脂肪酸的飼料飼養(yǎng)的雞得到的雞蛋中萃取的方法(專利文獻1)。另外，還已知將來自大豆的磷脂酰絲氨酸與海洋性的DHA鍵合磷脂酰絲氨酸(絲氨酸甘油磷脂接合體)混合來使用的方法(專利文獻2)。但是，這些方法中原料高價，且供給不穩(wěn)定。

另一方面，作為使DHA鍵合于磷脂來制作DHA鍵合磷脂的方法，有使用磷脂酶A2將磷脂的2位的脂肪酸水解而得的溶血磷脂、或在市售的溶血磷脂中導入DHA的方法(專利文獻3)。

但是，在專利文獻3中記載的方法中，未進行將磷脂的2位的脂肪酸水解時所使用的磷脂酶A2的除去和失活操作，因此磷脂酶A2等量殘留，因而有時鍵合于溶血磷脂的DHA在保存中經(jīng)時性脫離。另外，若想要將該DHA鍵合磷脂按照專利文獻1記載的方法進行絲氨酸化，則基于絲氨酸和磷脂酶D的絲氨酸化需要水，因而存在反應中在2位發(fā)生水解的問題，未能高效地進行DHA鍵合磷脂酰絲氨酸的合成。

現(xiàn)有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特開平9－121879號公報

專利文獻2：日本特表2011－525525公報

專利文獻3：日本特開2010－068799號公報

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明要解決的課題

使用安全的原料低價且穩(wěn)定地供給大量鍵合有高度不飽和脂肪酸的磷脂酰絲氨酸、尤其是DHA鍵合磷脂酰絲氨酸的方法尚未知。

因此，本發(fā)明的目的在于，提供能夠低價且穩(wěn)定地供給包含2位鍵合有大量高度不飽和脂肪酸的磷脂酰絲氨酸的含磷脂組合物的制造方法、以及包含大量鍵合有高度不飽和脂肪酸的磷脂酰絲氨酸的含磷脂組合物。

用于解決課題的手段

本發(fā)明人為了解決上述課題而反復認真研究的結果發(fā)現(xiàn)，若以磷脂和高度不飽和脂肪酸為原料，并實施包括特定的工序的制造方法，則能夠得到以高效率導入了高度不飽和脂肪酸的含磷脂組合物，并完成了本發(fā)明。

即，本發(fā)明的第一發(fā)明涉及一種含磷脂組合物的制造方法，其是含磷脂組合物整體中含有10重量％以上的磷脂酰絲氨酸、且構成脂肪酸整體中高度不飽和脂肪酸的含量為10～40重量％的含磷脂組合物的制造方法，并包括以下的工序(1)、(2)及工序(3)、(4)。

工序(1)：通過磷脂酶A2(PLA2)，進行溶血磷脂與高度不飽和脂肪酸的酯化反應，得到磷脂。

工序(2)：在工序(1)之后，使磷脂中的PLA2活性為10U/g(磷脂)以下。

工序(3)：在磷脂酶D(PLD)的存在下，進行磷脂與絲氨酸的混合物中的堿交換反應，形成包含磷脂酰絲氨酸的含磷脂組合物。

工序(4)：將包含磷脂酰絲氨酸的含磷脂組合物分離。

作為本發(fā)明的實施方式，可以采用在上述工序(2)中從磷脂除去PLA2的方式、和在上述工序(2)中使磷脂中的PLA2失活的方式中的至少一種。

本發(fā)明的一實施方式中，在工序(2)中，在工序(1)之后，向磷脂中添加無機鹽的甘油溶液、碳數(shù)4以下的醇、以及不與甘油混溶且溶解磷脂的有機溶劑，攪拌后靜置，形成包含磷脂的有機溶劑層、和包含PLA2的甘油溶液層，將該有機溶劑層從該甘油溶液層分離，由此從磷脂中除去PLA2。

在此，優(yōu)選無機鹽的甘油溶液中的水分量為10重量％以下。

優(yōu)選不與甘油混溶且溶解磷脂的有機溶劑是碳數(shù)為5～8的烴溶劑和/或醚。

優(yōu)選甘油溶液中的無機鹽濃度為0.2～40重量％。

優(yōu)選無機鹽為選自由硫酸鋅、氯化鉀、氯化鎂、硫酸鎂、氯化鈉及氯化鈣構成的組的至少1種。

優(yōu)選有機溶劑為己烷。

優(yōu)選碳數(shù)4以下的醇為乙醇。