[發(fā)明專利]制備低內(nèi)毒素殼聚糖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201380026792.3
• 申請日: 2013-03-25
• 公開（公告）號: CN104603155B
• 公開（公告）日: 2021-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: J.格拉德曼;C.哈迪;A.霍格思
• 申請（專利權(quán)）人: 醫(yī)療行業(yè)產(chǎn)品有限公司
• 主分類號: C08B37/08
• 分類號: C08B37/08;C08L5/08
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 張慧;彭昶

本發(fā)明涉及制備低內(nèi)毒素堿性殼聚糖的方法，還涉及制備低內(nèi)毒素中性殼聚糖、殼聚糖鹽和殼聚糖衍生物的方法，并涉及這些方法的產(chǎn)物。所述方法包括使殼聚糖與堿性溶液接觸，以形成混合物，并讓混合物保持至少約12小時。可用低內(nèi)毒素堿性殼聚糖制備其它有用的基于殼聚糖的產(chǎn)物。

本發(fā)明涉及制備低內(nèi)毒素堿性殼聚糖的方法，還涉及制備低內(nèi)毒素中性殼聚糖、殼聚糖鹽和殼聚糖衍生物的方法，并涉及這些方法的產(chǎn)物。

殼聚糖特別用于制備控制出血使用的止血材料。

殼聚糖是來自甲殼類動物處理的固體廢物衍生物，并且可從真菌培養(yǎng)物提取。殼聚糖是水不溶性陽離子聚合物質(zhì)。在殼聚糖用于止血材料之前，通常首先轉(zhuǎn)化成水溶性鹽。以這種方式，殼聚糖鹽在血液中可溶形成阻止血流的凝膠。

由于殼聚糖在身體中容易分解，殼聚糖鹽理想適用于本文所述應(yīng)用。殼聚糖通過溶菌酶轉(zhuǎn)化成葡糖胺，并因此自然從身體排泄。不必從身體去除殼聚糖。另外，殼聚糖鹽顯示溫和的抗菌性質(zhì)，因此，它們的使用減小感染風(fēng)險。

為了在適用于控制出血的止血材料制備中利用殼聚糖，有必要保證殼聚糖具有足夠低的內(nèi)毒素濃度。

內(nèi)毒素是格蘭氏陰性菌的外膜表面上存在的脂多糖。內(nèi)毒素對哺乳動物為高度毒性，特別是對人，且眾所周知難以從材料去除。在釋放進(jìn)入血流或通常未發(fā)現(xiàn)它們的其它組織時，內(nèi)毒素可變成熱原性。因此，內(nèi)毒素必須從藥學(xué)上可接受的產(chǎn)物去除。

處理去除或破壞熱原，特別是內(nèi)毒素，被稱為“去熱原”法。包含內(nèi)毒素的材料去熱原的技術(shù)包括離子交換色譜、超濾、蒸餾和針對破壞內(nèi)毒素的各種化學(xué)方法。

WO2008063503涉及從殼聚糖去除內(nèi)毒素的方法，所述方法包括以下步驟：

a) 在無菌環(huán)境中使用無菌無熱原設(shè)備和材料；

b) 使包含內(nèi)毒素的殼聚糖溶脹最多24小時；

c) 使1kg/25L至1.5kg/25L殼聚糖溶于0.01M至4.0M氫氧化物堿；

d) 連續(xù)攪拌所得殼聚糖堿溶液；

e) 在攪拌下，將溶液在60-100℃之間加熱45分鐘至4小時；

f) 用最多10x體積超純無內(nèi)毒素水沖洗溶液；

g) 將溶液中和到6.8和7.5之間的pH；

h) 形成超純低內(nèi)毒素殼聚糖漿料，并轉(zhuǎn)移到無內(nèi)毒素封閉系統(tǒng)；

i) 從漿料去除過量水。

這是一個復(fù)雜且費(fèi)用大的過程，尤其需要無菌設(shè)備，且需要用10x體積無內(nèi)毒素的水沖洗溶液。

US2006293509涉及通過以下步驟制備具有低內(nèi)毒素的水溶性殼聚糖的方法：

(a)使水不溶性殼聚糖與堿性溶液接觸大于1小時的第一時間段；

(b)理想用無內(nèi)毒素水沖洗水不溶性殼聚糖，以去除殘余堿性溶液；

(c)使水不溶性殼聚糖在包含相轉(zhuǎn)移劑的反應(yīng)溶液中部分乙酰化；

(d)使部分乙酰化的水溶性殼聚糖溶于包含表面活性劑且具有約7.0至約7.4的pH的水溶液；

(e)將水混溶性溶劑加入到水溶液，并進(jìn)一步將水溶液的pH調(diào)節(jié)到至少8.0的pH，以使具有低內(nèi)毒素含量的水溶性殼聚糖從水溶液/水混溶性溶劑混合物沉淀；和

(f) 任選在非溶劑中洗滌，例如，異丙醇。

然而，這一過程復(fù)雜且花費(fèi)大，并且合乎需要包括使用大量無內(nèi)毒素的水或其它液體。此過程也需要使用相轉(zhuǎn)移劑，并且經(jīng)數(shù)小時進(jìn)行。