[發明專利]表皮生長因子受體表面抗原的表位及其用途

在審

• 申請號: 201380022281.4
• 申請日: 2013-03-27
• 公開（公告）號: CN104394879A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 金世鎬;洪廣元;張基奐;金敏洙;李美禎;元鐘和;許旻奎;曹炫壽;俞知鎬
• 申請（專利權）人: 株式會社綠十字;財團法人牧巖生命工學研究所
• 主分類號: A61K38/17
• 分類號: A61K38/17;A61K38/16;A61K39/395;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;彭鯤鵬

技術領域

本發明涉及表皮生長因子受體(下文中稱為“EGFR”)上的表位及其用途。根據本發明一個示例性實施方案提供的表位是高度保守的，并且位于與結合表皮生長因子(下文中稱為“EGF”)緊密相關的結構域中。因此，包含所述表位的疫苗組合物、針對所述表位的抗體或者包含所述抗體的組合物可有效阻斷由EGFR與EGF結合所引起的信號轉導，并因此在治療多種疾病例如癌癥中可以是高度有價值的并且可用于治療這些疾病。此外，與所述表位結合的抗體可有效抑制多種EGFR配體與EGFR的結合，所述EGFR配體例如不僅包括EGF，還包括轉化生長因子-a(TGF-a)、雙調蛋白(AR)、β動物纖維素(betacellulin，BTC)、表皮調節素(epiregulin，EPR)和肝素結合的EGF樣生長因子(heparin-binding?EGF-like?growth?factor，HB-EGF)，因此可用于治療由EGFR活化引起的多種疾病。

此外，本發明涉及產生所述表位的特異性抗體的方法。

背景技術

治療癌癥的免疫治療方法具有這樣的優點，即，與手術、放療或化療相比，提高了對患者中的目標疾病的特異性，從而增強了抗癌效果并降低了副作用。腫瘤特異性單克隆抗體已經用作治療劑，其通過靶向根據多種類型的癌特異性過表達的某些蛋白質來獲得抗癌效果，在腫瘤治療過程中是非常有用的。

表皮生長因子受體(EGFR)是分子量為170kDa的I型膜蛋白，并已知在多種類型的腫瘤中過表達。對EGFR的研究已經持續了很長一段時間，并且當前已經成功進行了細胞結構域(Garrett?TP等，Cell，2002，110：763-773)和細胞內激酶結構域(Stamos?J等，J.Biol.Chem.，2002，277：46265-46272)的晶體學(crystallographic)研究。這些研究顯示了受體及其配體行為的重要信息。EGFR是細胞表面相關分子，其通過在此結合EGF配體和轉化生長因子-a(TGF-a)來被活化。與配體結合后，受體二聚化以使細胞內的酪氨酸激酶結構域磷酸化。結果，后續的信號級聯反應被激活從而誘導正常細胞的生長和增殖以及腫瘤細胞的生長。特別地，因為腫瘤細胞的功能主要依賴于EGFR，所以所述受體由于抑制EGFR調控功能的可能性程度而被視為治療的常用標靶。

例如在某些類型的癌癥中觀察到EGFR的過表達，例如肺癌、乳腺癌、結腸癌、胃癌、腦癌、膀胱癌、頭頸癌、卵巢癌和前列腺癌。當使用針對EGFR的抗體抑制EGFR與EGF的結合時，癌細胞的生長可以受到抑制從而治療癌癥，這已經通過使用針對EGFR的單克隆抗體在實驗上證明。

同時，雖然已經進行了嘗試來闡述EGFR結合EGF的各個結構域的位置(S.Yokoyama等，Cell，2002，110：775-787)，但是必須進一步研究，在使用這樣的EGFR結構域作為表位的情況下，抗體是否抑制由EGF引起的EGFR信號轉導通路的激活。

近年來，在臨床領域用于治療轉移性結直腸癌的西妥昔單抗(Cetuximab)(C225抗體，產品名：Erbitux；ImClone，US)是通過使小鼠抗體的可變區與人抗體IgG1恒定區結合而得到的嵌合抗體(具有約30％的小鼠氨基酸序列)，并因此在體外抑制由EGF引起的腫瘤細胞生長以及EGFR磷酸化，并且在裸鼠中抑制人腫瘤形成。此外，發現所述抗體與某些化療藥劑對根除異種移植小鼠模型中的人腫瘤有協同作用。然而，西妥昔單抗存在這樣的問題，即，其在患者(約10％)中導致免疫應答，并且僅能用作與化療藥劑的聯合治療，因為其在用于獨立治療時不具有令人滿意的治療效果。