[發明專利]分離方法和分離基質

有效

• 申請號: 201380021764.2
• 申請日: 2013-04-22
• 公開（公告）號: CN104245078A
• 公開（公告）日: 2014-12-24
• 發明（設計）人: J.漢斯森;G.羅德里戈;T.E.塞德曼
• 申請（專利權）人: 通用電氣健康護理生物科學股份公司
• 主分類號: B01D15/36
• 分類號: B01D15/36;B01J20/26;B01J20/289;B01J39/26;G01N30/96
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;林森

1.一種將生物分子與液體中的至少一種其它組分分離的方法，所述方法包括使所述液體與包含固體載體和與所述固體載體結合的聚合物鏈的分離基質接觸的步驟，其中所述聚合物鏈包含從結構CH₂=CH-L-X的第一個單體衍生的單元，其中L是共價鍵或包含2-6個碳原子的烷基醚或羥基取代的烷基醚鏈，和X是磺酸根或膦酸根基團。

2.權利要求1的方法，其中所述生物分子是蛋白、肽或核酸。

3.權利要求1或2的方法，其中所述生物分子是免疫球蛋白、免疫球蛋白片段或含免疫球蛋白的蛋白，如抗體、抗體片段、抗體綴合物或抗體融合蛋白。

4.前述權利要求中任一項的方法，其中所述至少其它組分是蛋白，例如宿主細胞蛋白；蛋白A；或免疫球蛋白、免疫球蛋白片段或含免疫球蛋白的蛋白的聚集體。

5.前述權利要求中任一項的方法，其中所述液體是來自先前的色譜步驟的洗脫液，所述色譜步驟例如親和步驟、離子交換步驟、多峰步驟或疏水相互作用步驟。

6.權利要求1-4中任一項的方法，其中所述液體是來自分離基質的流通液，所述基質例如離子交換基質、多峰基質或疏水相互作用基質。

7.前述權利要求中任一項的方法，其中所述生物分子是免疫球蛋白、免疫球蛋白片段或含免疫球蛋白的蛋白，例如抗體、抗體片段、抗體綴合物或抗體融合蛋白且其中至少1%，例如至少5%或至少10%的所述生物分子呈聚集體的形式。

8.前述權利要求中任一項的方法，還包括用洗脫緩沖液從所述分離基質洗脫所述生物分子的步驟。

9.前述權利要求中任一項的方法，還包括用清洗液，例如包含至少0.1?mol/l?NaOH或0.5-2?mol/l?NaOH的堿性清洗液，清洗所述分離基質的步驟。

10.前述權利要求中任一項的方法，其中所述聚合物鏈是共聚物鏈且還包含從第二個非荷電單體衍生的單元。

11.權利要求10的方法，其中第二個非荷電單體是N-乙烯基酰胺。

12.權利要求10或11的方法，其中所述第二個非荷電單體選自N-乙烯基吡咯烷酮、N-乙烯基己內酰胺、N-乙烯基甲酰胺和N-乙烯基乙酰胺。

13.前述權利要求中任一項的方法，其中L是共價鍵或-CH₂-O-L’-，其中L’是C₂-C₄或C₃-C₄亞烷基鏈，其任選地被至少一個羥基取代。

14.前述權利要求中任一項的方法，其中所述第一個單體選自乙烯基磺酸鹽、乙烯基膦酸鹽和烯丙氧基羥基丙基磺酸鹽。

15.權利要求10-14中任一項的方法，其中在所述共聚物鏈中，從第一個單體衍生的單元與從第二個單體衍生的單元的摩爾比是0.05至5，例如0.10至2或0.5至2。

16.一種分離基質，其包含固體載體和與所述固體載體結合的共聚物鏈，其中所述共聚物鏈包含從以下單體衍生的單元：

a)?結構CH₂=CH-L-X的第一個單體，其中L是共價鍵或包含2-6個碳原子的烷基醚或羥基取代的烷基醚鏈，和X是磺酸根或膦酸根基團；和

b)?第二個非荷電單體。

17.權利要求16的分離基質，其中L是共價鍵或-CH₂-O-L’-，其中L’是C₂-C₄或C₃-C₄亞烷基鏈，其任選地被至少一個羥基取代。

18.權利要求16或17的分離基質，其中所述至少一個荷電單體選自乙烯基磺酸鹽、乙烯基膦酸鹽和烯丙氧基羥基丙基磺酸鹽。

19.權利要求16-18中任一項的分離基質，其中所述第二個非荷電單體是N-乙烯基酰胺。

20.權利要求16-19中任一項的分離基質，其中所述第二個非荷電單體選自N-乙烯基吡咯烷酮、N-乙烯基己內酰胺、N-乙烯基甲酰胺和N-乙烯基乙酰胺。