[發明專利]酶檢測裝置

在審

• 申請號: 201380021021.5
• 申請日: 2013-04-22
• 公開（公告）號: CN104487590A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 保羅·大衛;凱特·帕克
• 申請（專利權）人: 莫洛克有限公司
• 主分類號: C12Q1/37
• 分類號: C12Q1/37;G01N33/543;G01N33/573
• 代理公司: 杭州金道專利代理有限公司 33246
• 代理人: 黎雙華

1.用于測試樣本中具有裂解底物的酶的裂解活性存在的酶檢測裝置，該裝置包括：

(i)用于加入樣本中的指示分子，該指示分子包括：

(a)裂解位點，如果該酶的裂解活性存在，該裂解位點能夠被所述的酶裂解；

(b)第一捕獲位點；和

(c)包括第二捕獲位點的檢測區域：

其中，裂解位點的裂解導致包括有檢測區域的指示分子片段的釋放；

(ii)用于接收樣本的第一捕獲區域，其中第一捕獲區域包括能夠結合指示分子的第一捕獲位點的第一捕獲分子，但并不結合包括有檢測區域的指示分子的裂解片段，和其中，通過第一捕獲位點的結合，指示分子被捕獲到第一捕獲分子上從而實質防止任何隨后被該酶引起的裂解位點的裂解；和

(iii)用于接收與第一捕獲區域接觸后的測試樣本的第二捕獲區域，其中第二捕獲區域包括能夠結合指示分子的第二捕獲位點的第二捕獲分子，其中，第二捕獲區域與第一捕獲區域處于空間上的分離；和其中，在檢測區域對通過第二捕獲位點被結合到第二捕獲分子上的任何被裂解的指示分子的檢測，表示測試樣本中酶裂解活性的存在。

2.根據權利要求1所述的裝置，其中被檢測的酶選自如下種類：氧化還原酶；水解酶和裂解酶，和包括蛋白酶、肽酶、脂肪酶、核酸酶、糖酶、磷酸酶、硫酸酯酶、神經氨酸苷酶,唾液酸苷酶、脂酶，脫氧核糖核酸酶(DNAse)和核糖核酸酶(RNAse)的亞種。

3.根據權利要求1所述的裝置，其中，被檢測的酶為金屬蛋白酶或者人類衍生的中性粒細胞彈性蛋白酶。

4.根據權利要求1-3之一所述的裝置，其中，指示分子包括多個裂解位點，和其中在任何一個裂解位點的裂解引起包括有檢測區域的指示分子的片段的釋放。

5.根據權利要求1-4之一所述的裝置，其中，指示分子的第一捕獲位點和第一捕獲區域中的第一捕獲分子為結合對中的兩半，其中所述的結合對選自如下的結合對：-抗原和抗體或者他們的結合片段；生物素和親和素，鏈霉親和素，中性或凱普親和素；免疫球蛋白(或者片段)和蛋白A或G；碳水化合物和血凝素；與核苷酸序列互補的序列；配體和受體分子；激素和激素結合蛋白；酶輔助因子和酶；酶的抑制劑和酶；纖維素結合區域和纖維素纖維；固定的氨基苯基硼酸和順式-二醇軸承分子；葡聚糖和纖維素纖維和他們的類似物，衍生物以及片段。

6.根據權利要求1-4之一所述的裝置，其中，指示分子的復數可以結合每一個第一結合分子。

7.根據權利要求1-6之一所述的裝置，其中，指示分子的第二捕獲位點和第二捕獲分子為結合對中的兩半，其中，所述的結合對選自如下的結合對：-抗原和抗體或者他們的結合片段；生物素和親和素，鏈霉親和素，中性或凱普親和素；免疫球蛋白(或者片段)和蛋白A或G；碳水化合物和血凝素；與核苷酸序列互補的序列；配體和受體分子；激素和激素結合蛋白；酶輔助因子和酶；酶的抑制劑和酶；纖維素結合區域和纖維素纖維；固定的氨基苯基硼酸和順式-二醇軸承分子；葡聚糖和纖維素纖維和他們的類似物，衍生物以及片段。

8.根據權利要求1-7之一所述的裝置，其中，另外包括報告分子，該報告分子被結合或者能夠結合到指示分子的檢測區域上。

9.根據權利要求8所述的裝置，其中，報告分子通過第二捕獲位點結合到檢測區域上，其中，報告分子與第二捕獲位點的結合不會消弱第二捕獲位點結合到第二捕獲分子的結合能力。

10.根據權利要求8或9所述的裝置，其中，報告分子包括選自如下的報告半族：金顆粒；染料；發光物質；熒光分子；放射性物質；可見物質；脂質體或其他包括產生信號底物的囊；電子活化粒子；或者酶其底物的組合。

11.根據權利要求8-10之一所述的裝置，其中，報告分子與檢測區域的結合為通過同時結合檢測區域和報告分子的適配子進行間接和媒介的結合。

12.根據權利要求8-11之一所述的裝置，其中，多個報告分子可以結合到每一指示分子。

13.根據權利要求8-12之一所述的裝置，其中，該裝置為流體裝置，和第一捕獲區域和第二捕獲區域沿著層析介質以連續的位置存在。

14.在用于如權利要求1-13所述的酶檢測裝置中的指示分子。