[發明專利]改進了對革蘭氏陰性細菌的結晶紫?碘復合物的脫色的革蘭氏染色方法

有效

• 申請號: 201380020183.7
• 申請日: 2013-02-22
• 公開（公告）號: CN104245955B
• 公開（公告）日: 2018-03-16
• 發明（設計）人: C.維德納;C.康諾利
• 申請（專利權）人: 文塔納醫療系統公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所11494
• 代理人: 封新琴

1.一種對樣品進行革蘭氏染色的非診斷方法，包括：

將所述樣品加載到自動染色裝置中；

使所述樣品與初級染劑在足以將革蘭氏陽性細菌和革蘭氏陰性細菌的細胞壁染色的條件下接觸；

使所述樣品與捕獲劑在足以形成初級染劑-捕獲劑復合物的條件下接觸；

使所述樣品與慢作用脫色制劑在足以從革蘭氏陰性細菌而非革蘭氏陽性細菌除去初級染劑-捕獲劑復合物的條件下接觸，其中所述慢作用脫色制劑包含1,2-丙二醇；

使所述樣品與復染劑在足以將脫過色的革蘭氏陰性細菌染色的條件下接觸。

2.權利要求1的非診斷方法，其中使所述樣品與復染劑接觸在使所述樣品與慢作用脫色制劑接觸的至少30秒后進行。

3.權利要求1的非診斷方法，其中使所述樣品與慢作用脫色制劑接觸達至少30秒。

4.權利要求3的非診斷方法，其中使所述樣品與慢作用脫色制劑接觸達至少60秒。

5.權利要求1-4中任一項的非診斷方法，其中使用壓縮空氣完成所述樣品與慢作用脫色制劑的接觸。

6.權利要求1-5中任一項的非診斷方法，其中所述慢作用脫色制劑包含慢作用脫色劑和快作用脫色劑。

7.權利要求6的非診斷方法，其中所述慢作用脫色制劑包含至少80%的所述慢作用脫色劑和不超過20%的所述快作用脫色劑。

8.權利要求1-7中任一項的非診斷方法，其中所述方法進一步包括檢測革蘭氏陽性細菌或革蘭氏陰性細菌。

9.權利要求1-8中任一項的非診斷方法，其中所述初級染劑是結晶紫試劑且所述捕獲劑是碘試劑。

10.權利要求9的非診斷方法，其中所述自動染色裝置包含：

用于放置多個載玻片的轉盤式傳送工具，每個上面都有待染色的樣品；

用于以預定速度旋轉所述轉盤式傳送工具的工具；和

在所述轉盤式工具旋轉期間指引和控制各個試劑加載到所述載玻片和樣品上的工具，

且其中所述方法包括：

將結晶紫試劑指引到轉盤式傳送工具中的載玻片上以使所述載玻片上的細菌與所述結晶紫試劑接觸；

將水、水性緩沖液、或水性去污劑指引到轉盤式傳送工具中的載玻片上以從所述載玻片洗去結晶紫試劑；

將碘試劑指引到轉盤式傳送工具中的載玻片上以使所述載玻片上的細菌與所述碘試劑接觸；

將水、水性緩沖液、或水性去污劑指引到轉盤式傳送工具中的載玻片上以從所述載玻片洗去碘試劑；

同時或分開地將慢作用脫色制劑和復染劑指引到轉盤式傳送工具中的載玻片上；并

將水、水性緩沖液、或水性去污劑指引到轉盤式傳送工具中的載玻片上以從所述載玻片洗去混合試劑。

11.權利要求10的非診斷方法，其中所述慢作用脫色制劑從革蘭氏陰性細菌中去除結晶紫試劑和碘試劑需要至少60秒。

12.一種組合物，其充當慢作用脫色制劑，其包含至少80%的一種或多種慢作用脫色劑和不超過20%的一種或多種快作用脫色劑，其中所述一種或多種慢作用脫色劑包含1,2-丙二醇。

13.一種用于自動化革蘭氏染色的試劑盒，其包含：

在第一容器中的慢作用脫色制劑，其中所述慢作用脫色制劑包含1,2-丙二醇；

在第二容器中的初級染劑制劑；

在第三容器中的捕獲劑制劑；和

在第四容器中的復染劑制劑。

14.權利要求13的試劑盒，其中所述容器配置為加載到自動化染色裝置中。

15.權利要求13或14的試劑盒，其還包含一個或多個用于裝載或固定待測樣品的顯微鏡載玻片。

16.權利要求15的試劑盒，其還包含一個或多個對照載玻片。